瓜花葉病毒2型PCR試劑盒組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B：1×10ml。
產(chǎn)品名稱(chēng) 規(guī)格 分類(lèi)
瓜花葉病毒2型PCR試劑盒注意事項(xiàng)：建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽(yáng)性質(zhì)控品。4. PCR擴(kuò)增（擴(kuò)增區(qū)）
1) 儀器設(shè)置（以ABI Prism 7500為例）
將PCR反應(yīng)管放入PCR儀內(nèi)，按照對(duì)應(yīng)順序設(shè)置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽(yáng)性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM，Quencher Dye為None，參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ） 擴(kuò)增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號(hào)，反應(yīng)體系為25 μl。
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 基線(xiàn)（Baseline）設(shè)定：應(yīng)選擇該次實(shí)驗(yàn)指數(shù)擴(kuò)增前所有樣本熒光信號(hào)比較穩(wěn)定的一段區(qū)域（所有樣本熒光信號(hào)無(wú)較大波動(dòng)），起始點(diǎn)（Start）應(yīng)避開(kāi)熒光采集起始階段的信號(hào)波動(dòng)，終止點(diǎn)（End）應(yīng)比早出現(xiàn)指數(shù)擴(kuò)增的樣本Ct值減少1~3個(gè)循環(huán)，建議基線(xiàn)設(shè)為6~15。
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值線(xiàn)設(shè)定在剛好超過(guò)正常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲線(xiàn)的點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
1. 陰性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陰性，無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct；
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小于等于35；
3. 以上要求需在一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
1. 陽(yáng)性：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且Ct＜38；
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本；對(duì)于可疑樣本建議復(fù)核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸、保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降，可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果。【試劑盒使用注意事項(xiàng)】
1. 有關(guān)實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范請(qǐng)嚴(yán)格按照行業(yè)行政主管部門(mén)頒布的有關(guān)基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)范執(zhí)行。
2. 本試劑盒僅用于體外檢測(cè)。
3. 實(shí)驗(yàn)請(qǐng)嚴(yán)格分區(qū)操作：
*區(qū)：PCR前準(zhǔn)備區(qū) — 準(zhǔn)備擴(kuò)增所需試劑；
第二區(qū)：樣本處理區(qū) — 待測(cè)樣本和對(duì)照品處理；
第三區(qū)：檢測(cè)區(qū) — PCR擴(kuò)增檢測(cè)。
4. 各區(qū)物品均為，不得交叉使用，避免污染，實(shí)驗(yàn)后即請(qǐng)清潔工作臺(tái)；
5. 試劑盒內(nèi)各試劑使用前，充分融化后請(qǐng)稍事離心。
6. 在－20℃保存的樣本裂解產(chǎn)物，應(yīng)在加樣前置室溫解凍，作短暫離心后使用。
7. 分裝有反應(yīng)液的檢測(cè)板或裝入密實(shí)袋內(nèi)再轉(zhuǎn)移至樣本區(qū)。
8. 加樣時(shí)應(yīng)使樣品*落入反應(yīng)液中，不應(yīng)有樣品粘附于管壁上，加樣后應(yīng)盡快封上封板膜。
9. 擴(kuò)增完畢立即取出檢測(cè)板，密封在塑料袋內(nèi)，丟棄于地點(diǎn)。
10. 反應(yīng)液分裝時(shí)應(yīng)盡量避免產(chǎn)生氣泡，上機(jī)前注意檢查各反應(yīng)管是否蓋緊，以免熒光物質(zhì)泄露污染儀器。
11. 實(shí)驗(yàn)中用過(guò)的吸頭請(qǐng)直接打入盛有1%次的廢物缸內(nèi)，并與其他廢棄物品一同滅菌后丟棄。
12. 工作臺(tái)及各物品定期用1%次、75%酒精或紫外燈進(jìn)行消毒。
瓜花葉病毒2型PCR試劑盒
| 參考價(jià) | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
- 公司名稱(chēng)上海雅吉生物科技有限公司
- 品 牌
- 型 號(hào)
- 所 在 地上海市
- 廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)廠(chǎng)家
- 更新時(shí)間2019/6/12 9:03:32
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上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月，是一家面向生命科學(xué)領(lǐng)域，提供科研類(lèi)試劑、耗材、儀器、技術(shù)服務(wù)的生物企業(yè)。包括分子生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、細(xì)胞學(xué)等 。旗下?lián)碛?“雅吉生物”、“晶風(fēng)生物”、“彩佑實(shí)業(yè)”、“GTX” 品牌。通過(guò)公司各部門(mén)員工的共同努力在行業(yè)內(nèi)享有一定的聲譽(yù)，深得新老客戶(hù)厚愛(ài)。本著“服務(wù)、誠(chéng)信、進(jìn)取”的精神，堅(jiān)持溝通你我，創(chuàng)新服務(wù)，為國(guó)內(nèi)外廣大用戶(hù)提供產(chǎn)品和服務(wù)。
雅吉生物的試劑盒，在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室廣泛使用，深受廣大科研人員好評(píng)，先后在各雜志文章中被引用，歡迎選購(gòu)。公司在重視產(chǎn)品質(zhì)量的同時(shí)，也建立了一套多部門(mén)聯(lián)動(dòng)服務(wù)體系，努力把我們方便、快捷、周到的服務(wù)提供給每一個(gè)客戶(hù)。
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