中科溯源高效液相色譜儀(HPLC)、高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、*、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。
儲液器中的流動相被高壓泵打入檢測系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣本溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的“吸附-解吸”的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣本濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式輸出檢測結果。
色譜特點高效液相色譜儀操作步驟如下:
1). 過濾流動相,根據需要選擇不同的濾膜.
2). 對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。
3). 打開hplc工作站(包括計算機軟件和色譜儀),連接好流動相管道,連接檢測系統。
4). 進入hplc控制界面主菜單,點擊manual,進入手動菜單。
5). 有一段時間沒用,或者換了新的流動相,需要先沖洗泵和進樣閥。
6). 調節流量,初次使用新的流動相,可以先試一下壓力,流速越大,壓力越大,一般不要超過2000。
7). 設計走樣方法。
8). 進樣和進樣后操作。
9). 關機時,先關計算機,再關液相色譜。
10). 填寫登記本,由負責人簽字。
11). 流動相均需色譜純度,水用20m的去離子水。
12). 柱子是非常脆弱的,*次做的方法,先不要讓液體過柱子。
13). 所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。
14). 壓力不能太大,hao 不要超過2000 psi。
高壓——壓力可達150~300 kg/cm2。色譜柱每米降壓為75 kg/cm2以上。
高速——流速為0.1~10.0 mL/min。
高效——塔板數可達5000/米。在一根柱中同時分離成份可達100種。
高靈敏度——紫外檢測器靈敏度可達0.01ng。同時消耗樣品少。
HPLC與經典液相色譜相比有以下優點:
速度快——通常分析一個樣品在15~30 min,有些樣品甚至在5 min內即可完成。
分辨率高——可選擇固定相和流動相以達到jia 分離效果。
靈敏度高——紫外檢測器可達0.01ng,熒光和電化學檢測器可達0.1pg。
色譜柱可反復使用——用一根色譜柱可分離不同的化合物。
樣品量少,容易回收——樣品經過色譜柱后不被破壞,可以收集單一組分或做制備。
國家標準:《高效液相色譜儀》(GB/T 26792-2011)