培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
下列是產(chǎn)品的訂購信息：
產(chǎn)品名稱 | 293 Ad5+細(xì)胞，人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞系說明書 |
英文名稱 | 293 Ad5+ cell, primary human embryo kidney transformed cell lines |
貨號 | EY-X63819 |
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進(jìn)行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
?
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
巨大戟醇 CAS 30220-46-3 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢
貝萼皂苷元 CAS 6989-24-8 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢
三七皂苷R2(R型) CAS 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
環(huán)氧前胡 CAS 35740-18-2 規(guī)格：HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
蒜氨酸 CAS 556-27-4 規(guī)格：20mg 訂購|咨詢
喬松素 CAS 規(guī)格：約20mg 訂購|咨詢
;秋水仙素 CAS Colchicine 規(guī)格：HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
8-氧黃連堿 CAS 規(guī)格：HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
cis-紫莖女貞苷B （95%） CAS 147396-02-9 規(guī)格：10mg 訂購|咨詢
啡酸乙酯 CAS 102-37-4 規(guī)格：50ml 訂購|咨詢
乃近 對照品 CAS 規(guī)格：200mg 訂購|咨詢
293 Ad5+細(xì)胞，人原胚腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞系說明書扭轉(zhuǎn)原腸胚形成同源蛋白1抗體 英文名稱：TWSG1 0.2ml
Tuftsin蛋白抗體 英文名稱：Tuftsin 0.2ml
跨膜蛋白161A抗體 英文名稱：TMEM161A 0.2ml
原癌基因8抗體 英文名稱：TTC23 0.2ml
壞死因子α誘導(dǎo)蛋白8抗體 英文名稱：TNFAIP8 0.2ml
壞死因子受體相互作用蛋白抗體 英文名稱：TRIP 0.1ml
TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體 英文名稱：TBCD4 0.2ml
壞死因子受體相關(guān)蛋白4抗體 英文名稱：TRAF4 0.1ml
結(jié)構(gòu)蛋白家族1抗體 英文名稱：TCTN1 0.2ml
癌雌激素誘導(dǎo)蛋白抗體 英文名稱：TFF1 0.1ml
跨膜蛋白18抗體 英文名稱：Tmem18 0.2ml
