細(xì)胞名稱  大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-011費(fèi)用
形態(tài)特性 上皮樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1：

3傳代，3-4天傳1次  

傳代情況 C5

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

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【培養(yǎng)指南】
大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-011費(fèi)用對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細(xì)胞凍存】
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-011費(fèi)用凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對細(xì)胞造成損害。復(fù)旦細(xì)胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價(jià)格，本公司出售的所有細(xì)胞僅供科研使用。
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質(zhì)量規(guī)格：含量測定DextranD70葡聚糖D70/右旋糖苷

質(zhì)量規(guī)格：含量測定SephadexG-50葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)

質(zhì)量規(guī)格：含量測定SephadexG-50葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(中顆粒)

質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測定Glucurolactone（標(biāo)準(zhǔn)品）

質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR4-FLUOROCINNAMONITRILE（標(biāo)準(zhǔn)品）

質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Glucose-6-phosphatedehydrogenase葡萄糖-6-磷酸脫氫酶

質(zhì)量規(guī)格：熔點(diǎn)測定Glucose-6-phosphatedehydrogenase葡萄糖-6-磷酸脫氫酶，硫酸銨懸浮液

質(zhì)量規(guī)格：≥99%,BRCalciumgluconate,hydrate

Matriptase2膜型蛋白酶2抗體規(guī)格:0.2mlMEK1/2(MAPKK1)絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體規(guī)格:0.1ml

LPAP淋巴細(xì)胞磷蛋白磷酸酶相關(guān)蛋白抗體規(guī)格:0.1mlERK2/MAPK1絲裂原活化蛋白激酶1抗體規(guī)格:0.1ml

HRH4/GPCR105組織胺H4受體抗體規(guī)格:0.1ml

COPS8信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體規(guī)格:0.2ml

Nm23/NME1/NME2瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體規(guī)格:0.1ml

ALDH1L1乙醛脫酶1蛋白家族L1抗體規(guī)格:0.1ml

IGSF6免疫球蛋白超家族成員6抗體規(guī)格:0.2ml

phospho-NUDC(Ser326)磷酸化細(xì)胞核分離基因C蛋白抗體規(guī)格:0.1ml

ME1胞漿蘋果酸酶1抗體規(guī)格:0.2ml

DBH多巴胺β羥化酶抗體規(guī)格:0.1ml
大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-011費(fèi)用AKAgar（No.2）250gAK瓊脂（2號）

AHMMedium250gAHM鑒別培養(yǎng)基

AgarY，Modified250g改良Y培養(yǎng)基

AgarPowder250g瓊脂粉

AgarmediumS(R2A)250g瓊脂培養(yǎng)基S

AgarmediumO(Baird-Parkeragar)250g瓊脂培養(yǎng)基O

AgarMediumN(CetrimideAgar)250g瓊脂培養(yǎng)基N（溴化十六烷基三瓊脂）

大鼠正常食管上皮細(xì)胞；RNEEC/HL-011費(fèi)用細(xì)胞分類：
*種：
是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲存的方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進(jìn)口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。