訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱:伊氏錐蟲(chóng)(TE)核酸檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:50T
編號(hào):BH-P96789
分類:熒光PCR法
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
準(zhǔn)備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
NG108-15[108CC15]細(xì)胞,小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞 結(jié)腸癌細(xì)胞,Colo205細(xì)胞 高背鯽魚(yú)尾鰭細(xì)胞;GBJd原兒茶醛,3,4-二羥基苯3,4-Dihydroxybenzaldehyde≥98%
大鼠氣管上皮細(xì)胞;RTE原兒茶醛()3,4-DihydroxybenzaldehydeHPLC≥98%,
PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 酯鹽酸鹽Thiamphenicol glycinate HCl>98%,BR
周邊細(xì)胞培養(yǎng)基PM2.4-二羥基-6-甲基-乙酯Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate>98%
EPHA4 Others Human EPHA4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 恩拉霉素,持久殺菌素EnduracidinBR,含量8%以上
正常大鼠腎細(xì)胞;NRK堿()HPLC≥98%,Wilforine
22RV1細(xì)胞,前列腺癌細(xì)胞 肝癌細(xì)胞,Bel-7405細(xì)胞 CL-0024Anglne(卵巢癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2新藤黃酸()HPLC≥98%,Neogambogic acid
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1延齡草苷()HPLC≥98%,Diosgenin glucoside
IL1RAPL1 Others Human IL1R8 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-反式-對(duì)香豆酰酪胺()HPLC≥98%,N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine
細(xì)胞衰老檢測(cè)試劑盒CSA大內(nèi)皮素-1(1-38),>95%,BRBig Endothelin-1 (1-38), human
伊氏錐蟲(chóng)(TE)核酸檢測(cè)試劑盒CCL16 Protein Human 重組 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)dGMP2′-脫氧鳥(niǎo)苷-5′-單嶙酸二鈉鹽25克BR,98%
LTEP-a-2(肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-十一(烷)同 2-Undqccnonq 2011/1/9
犬腎細(xì)胞系/IgR;MDCK/IgRCyanuricchloride2,4,6-三錄-1,3,5-三嗪5克AR,98%
CCL1 Others Mouse 小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS堿性嶙酸酶(含酶及稀釋液)生物技術(shù)級(jí)5000 UnitsCOLD
5637 膀胱癌細(xì)胞313222-87-6PALLADIUM(II) nitnATE HYDRATE
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。