. 桂林市藥物結構確認及雜質分析-CMA資質
MRM 技術在生物標志物檢測中的應用運用蛋白組學的方法進行生物標志物的發現和檢測是目前蛋白質組研究的熱點。隨著蛋白質組學技術的發展，采用二維凝膠電泳或槍法(shotgun)技術尋找上調或下調蛋白質以發現生物標志物的研究策略已得到很大的豐富和完善。目前，標志物發現- 驗證- 臨床確證的研究模式已得到研究者們的廣泛認可[5,6]。即在發現階段從疾病組織中尋找與正常組織有差異的蛋白質，到驗證階段使用M R M 技術于組織周邊體液或血漿中檢測該差異蛋白質，利用子離子譜進行定性，后用M R M 技術和同位素稀釋或質量標簽標記(mTRAQ)的方法對篩選出來的標記物定量，進行臨床確證。這種研究模式使體液中生物標志物的發現和驗證更為有效、科學和合理。MRM 技術與金標準ELISA 相比，周期更短、成本更低，更重要的是能進行與同一疾病相關的多個標記物同時測定且不需制備其相應的抗體，具有*的應用*性。M R M 技術在驗證和確證階段都有極其重要的應用，充分體現了該技術在生物標志物檢測領域的價值。例如，在Whiteaker 等[7]的研究中，以小鼠為模型研究乳腺癌的生物標志物；用液相色譜串連質譜(LC-MS/MS)對腫瘤和正常乳房組織的蛋白質進行檢測，篩查出700 個以上差異蛋白質；再聯合抗體和MRM 技術后鑒定了fubulin-2 作為血漿中的生物標志物。實驗結果進一步驗證了M R M 技術驗證生物標志物的方法，在發現新型生物標志物研究中的可行性。Kuhn 等研究[8]表明，MRM 技術與同位素標記相結合進行定量分析，可以節省分析時間，并且能得到與抗體和免疫分析等經典驗證方法具良好相關性的檢測結果。他們采用同位素標記合成肽段和MRM 技術相結合，檢測來自類風濕性關節炎患者血漿樣本中診斷標記物C- 反應蛋白的濃度，并對方法的回收率、線性等進行了考察，結果能達到高達66%的回收率和3 個數量級以上的線性范圍。
二、IR（紅外）測試
儀器：北京瑞麗光譜儀器公司 WQF-520A傅里葉變換紅外光譜儀
測試條件：KBr壓片法
測試結果：各個樣品的吸收峰等列表如下：
吸收峰cm-1 | 基團 | 強度 |
（藥品結構分析）樣品 批號：B20151001 | ||
3444 | -OH | S |
3218、3149 | N-H | M |
2971、2939 | C-H | M |
1450、1371 | CH3、CH2 | M |
1621 | CH3CH2OCOO- | S |
解析：1、3444cm-1，為結晶水-OH伸縮振動吸收峰，屬強吸收峰
2、3218、3149cm-1，為伯胺N-H伸縮振動吸收峰，屬中等強度吸收峰；
3、2971、2939 cm-1，為甲基、亞甲基C-H伸縮振動吸收峰，屬中等強度吸收峰；
4、1450 、1371cm-1，為甲基、環烷烴CH2變形振動吸收峰，屬中等強度吸收峰；
5、1621 cm-1，為乳酸絡合成鹽振動吸收峰，屬強吸收峰；
可見，樣品（批號為：B20151001）的紅外光譜圖的特征吸收峰符合（藥品結構分析）的特征官能團的吸收峰。
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