公司產品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
1、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細胞一次；
2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入 5ml 培養
液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3）棄上清，沉淀細胞用 1-2ml 培養基重懸，然后按 1:2 比例進行分瓶傳代，最后放入 37℃，5%CO2細胞
培養箱中培養；
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
HCC-LM3人高轉移肝癌細胞 | 1×106 | P-X733 |
一、商品介紹：
產品名稱 | HCC-LM3人高轉移肝癌細胞 |
種屬 | 人 |
細胞別稱 | LM3；MHCC-LM3；MHCCLM3 ；人高轉移肝癌細胞 |
年齡性別 | 39歲 |
生長特性 | 貼壁生長 |
組織來源 | 肝臟 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
背景簡介 | HCCLM3細胞是一株由人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠、進行3次肺轉移篩選、取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發性肺轉移的肝癌細胞系。HCCLM3細胞被廣泛用于人肝癌發病機理的基礎和臨床研究，也可用于抗腫瘤藥物篩選。 |
生物安全等級 | 1 |
細胞規格 | 1×106 |
支原體檢測 | 無 |
基因表達情況 | |
保藏機構 | |
培養基 | 90%DMEM+10% FBS+PS |
培養條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
倍增時間 | ~35-48 hours |
2、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中的培養液，用 PBS 清洗細胞一次；
2）添加 0.25%消化液約 1ml 至培養瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入培養液終
止消化，輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h 后轉入液氮中進行長期保存。使用程序
降溫盒可直接放入-80℃。
二、細胞培養操作
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1-2 min（視細胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產品：
MAP4： 微管相關蛋白4抗體 艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich
NCI-H157(人非小細胞肺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 SRSV/3T3(SRSV轉化的3T3細胞) 大鼠血管內皮細胞生長因子B(VEGF-B)ELISA 試劑盒 Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG) 兔鉤端螺旋體IgG 96T
MSS1： 26S蛋白酶調節亞型7抗體 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽) 大鼠血管內皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 Sam(Human soluble adhesion molecules) 人可溶性粘附分子 96T
MEG1： 蛋白酪酸0酸酶非受體型4抗體 IL2RG Others Human 人 IL2RG / CD132 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
HRH3： 組織胺H3受體抗體 CL-0130K-562(人慢性骨髓性白血病細胞)5×106cells/瓶×2
M14細胞，人黑色素瘤細胞 枯草芽孢桿菌黑色變種 人肺癌細胞;A-427 [A427] 人巰基轉移酶(GST)ELISA試劑盒 Cx32(Connexin-32) 間隙連接蛋白32抗原 0.5mg
phospho-Histone H1.4 (Thr146)： 0酸化組蛋白H1抗體 IFNAR1 Others Mouse 小鼠 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細胞;GL-37 人硫轉移酶pi基因(GSTpi)ELISA 試劑盒 CX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原 0.5mg
HEATR4： HEATR4蛋白抗體 人肝永生化細胞;THLE-3
HCC-LM3人高轉移肝癌細胞人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 人氣管上皮細胞培養基 100mL 大鼠肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒 LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA) 人軍團菌抗體 人肝細胞HH
HGF Protein Human 重組人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 大鼠肝素蛋白聚糖(HSPG)ELISA試劑盒 PGE1 大鼠前列腺素E1 96T
phospho-PRL (Ser163)： 0酸化泌乳素抗體 ANGPTL7 Others Canine 狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細胞裂解液 (陽性對照)
MDA-MB-435 人癌高轉移細胞 大鼠肝素(HS)ELISA試劑盒 LP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM) 人軍團菌抗體 THLE-3細胞，人肝上皮細胞 人癌細胞,MCF-7(OLD)細胞 大鼠心肌細胞RCM
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠肝受體同源物1(LRH1)ELISA試劑盒 LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG) 人軍團菌抗體 CM-H133人視網膜muller細胞培養基100mL
三、培養注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
