高效液相色譜儀設備是近30年發展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的高效快速分離分析技術。它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發揮它的特長,為推動該領域的進步和發展作出了巨大貢獻。
高效液相色譜儀設備組成
1、輸液系統
包括溶劑柜、真空脫氣機、溶劑混合器、高壓泵等,其中核心部分是泵;泵的作用提供足夠的驅動力使流動相通過填充緊密的色譜柱。
洗脫方式也分為兩種:
(1)等度洗脫:在同一分析周期內流動相組成保持恒定,適合于組分數目較少,性質差別不大的樣品。
(2)梯度洗脫:采用兩種(或多種)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定程序連續改變流動相的濃度配比和極性的一種洗脫模式。用于分析組分數目多、性質差異較大的復雜樣品。
2、進樣系統
把分析試樣有效地送入色譜柱進行分離。一般有自動進樣器和手動進樣器,進樣量應不小于定量環體積的5-10倍(zui少3倍)。
3、分離系統
主要是色譜柱,色譜柱是一根裝滿填料的管子。色譜柱的材料有不銹鋼、塑料、玻璃等,其尺寸(內徑、長短)不盡相同;色譜柱填料主要有硅膠基質和聚合物基質,填料的粒徑不盡相同。
4、檢測器
對檢測器的要求:靈敏度高、重現性好、線性范圍寬、死體積小、對溫度及流量的變化不敏感等。主要有紫外檢測器、熒光檢測器、示差檢測器等。
示差檢測器是一種通用型檢測器,理論上可以檢測幾乎所有的化合物。其原理是基于含樣品的洗脫劑和洗脫劑二者折光指數的差異。示差檢測器受壓力變化、溫度變化、流動脈沖的影響較大,不適合進行梯度洗脫。