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R5421 感受態細胞100ul*50

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  • 公司名稱上海博湖生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質經銷商
  • 更新時間2024/11/23 12:49:10
  • 訪問次數1025
產品標簽:

R5421感受態細胞

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上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)是一家生物企業 ,主要從事免疫學、分子生物學和常規生化試劑的銷售。主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養基、標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。


上海博湖生物科技有限公司(Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.,China)先后與天津中醫學院、復旦大學、上海交通大學醫學院、上海交通大學、華東師范大學、第二軍醫大學、南京大學,暨南大學,南京工業大學,曙光醫院、華山醫院、瑞金醫院、上海有機研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關系。本公司可為您提供科研ELISA試劑盒,種屬標本齊全,有專門針對人血清、血漿、全血、分泌物、尿液、細胞培養上清液、組織勻漿、組織液等標本的試劑盒;另有針對各種動物(鼠、兔、牛、馬、雞、豬、狗、山羊、猴、魚)的科研試劑。


公司秉承“專注品質、信守承諾、積極溝通、創新服務”的企業文化積極參與生物領域的技術創新和技術服務,力求為我國科研事業更好的,更專業的服務!


公司售后服務宗旨:有質量問題可申請退換,有技術疑問可隨時給于解答,一對一的客服服務,客戶的需求也是我們不斷的更新服務。








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R5421 感受態細胞100ul*50菌株一種常用于質??寺〉木?。其φ80lacZΔM15基因的產物可與pUC載體編碼的b-半乳糖苷酶氨基端實現a互補,可用于藍白斑篩選。recA1和endA1 的突變有利于克隆DNA 的穩定和高純度質粒DNA的提取。
R5421 感受態細胞100ul*50 產品信息

R5421 感受態細胞100ul*50 操作方法(以下操作均按無菌條件的標準進行)
1 取感受態細胞置于冰浴中,如需分裝可將剛融化細胞懸液分裝到無菌預冷的離心管中,置于冰浴中。
●  一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100 μl,可以根據實際情況分裝使用。應注意所用DNA 體積不要超過感受態細胞懸液體積的十分之一。
以下實驗以100 μl感受態細胞為例。
R5421 感受態細胞100ul*502 向感受態細胞懸液中加入目的DNA(100 μl 的感受態細胞能夠被1 ng 超螺旋質粒DNA 所飽和),輕輕旋轉離心管以混勻內容物,在冰浴中靜置30 分鐘。
3 將離心管置于42℃水浴中放置60-90 秒,然后快速將管轉移到冰浴中,使細胞冷卻2-3 分鐘,該過程不要搖動離心管。
4 向每個離心管中加入900 μl 無菌的SOC 或LB 培養基(不含抗生素), 混勻后置于37℃搖床振蕩培養1 小時(160-220 轉/分鐘),目的是使質粒上相關的抗性標記基因表達,使菌體復蘇。
5 將離心管內容物混勻,吸取100 μl 已轉化的感受態細胞加到含相應抗生素的SOB 或LB 固體瓊脂培養基上,用無菌的彎頭玻棒輕輕的將細胞均勻涂開。將平板置于室溫直至液體被吸收,倒置平板,37℃培養12-16 小時。
R5421 感受態細胞100ul*50●  涂布用量可根據具體實驗來調整。如轉化的DNA 總量較多,可取更少量轉化產物涂布平板;反之,如轉化的DNA 總量較少,可取200-300 μl 轉化產物涂布平板。如果預計的克隆較少,可通過離心(4,000 rpm, 2分鐘)后吸除部分培養液,懸浮菌體后將其涂布于一個平板中。(涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉化菌落數過少可以將剩下的菌液再涂布新的培養板)
 注意事項
1. 感受態細胞應保存在 -70℃,不可多次凍融和放置時間過長,以避免降低感受態細胞的轉化效率。
2. 進行轉化操作時,應根據相應溫度及無菌條件的要求進行。
3 為防止轉化實驗不成功,可以保留部分連接反應液,以重新轉化,將損失降到低。
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