材料和方法編輯
1.標(biāo)本 人或動(dòng)物的肝組織等,甲醛—鈣液固定,冰凍切片,厚10μm。
2. 改良的油紅O染色液 油紅O 0. 5g, 50%乙醇100ml。將油紅O溶于乙醇內(nèi),且不斷攪拌至*溶解即可。配制好的染液置磨口瓶內(nèi)保存?zhèn)溆谩?br />3. 染色步驟 ①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油紅O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自來水終止分化;④蘇木素復(fù)染核,自來水返藍(lán),甘油明膠封片.
結(jié)果編輯
肝細(xì)胞內(nèi)的脂肪滴呈紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。

圖 肝脂肪變性:脂肪滴呈紅色,細(xì)胞核藍(lán)色。 改良
油紅O染色法×400
討論編輯
傳統(tǒng)配制油紅O染液 [1]  ,所用的丙酮和異丙醇極易揮發(fā),致使染液產(chǎn)生沉淀,染色時(shí)易在組織片上留下紅色的結(jié)晶,而影響結(jié)果的判斷。同時(shí)染液不易保存,每次染色時(shí)需要重新配制。我們經(jīng)實(shí)驗(yàn),采用50%乙醇作為溶解劑,減少了丙酮和異丙醇易揮發(fā)對(duì)人體的危害,染液不易產(chǎn)生沉淀;分化劑與油紅O染液中的溶劑性質(zhì)相似,這樣利于切片上多余染液的分化,故組織切片上沒有結(jié)晶產(chǎn)生。從而為病理診斷及鑒別診斷提供了可靠技術(shù)方法。組織常規(guī)用中性福爾馬林固定,但用甲醛—鈣液(40%甲醛10ml,蒸餾水90m1,氯化鈣1g)固定效果更好,這樣有利于保存磷脂。
封固顯示脂肪的切片時(shí),切片不宜太干,否則易產(chǎn)生氣泡。發(fā)現(xiàn)有氣泡,不能壓蓋玻片驅(qū)趕,因?yàn)檫@樣會(huì)使脂滴移位。若有氣泡可用溫水浸掉蓋玻片,而后再封固。
該方法操作簡便,染色結(jié)果鮮艷,染液可反復(fù)使用。 [2]