實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
詳細(xì)描述:
產(chǎn)品名稱:產(chǎn)氣腸桿菌探針法PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Enterobacter aerogenes
貨號:BJ-P9520
規(guī)格:50T
分類:熒光定量PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
實(shí)驗(yàn)過程:產(chǎn)品僅用于科研
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
小鼠酸性0酸酶elisa試劑盒 小鼠酸性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠酸性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠酸性0酸酶試劑盒、小鼠酸性0酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Lansoprazole 中文名: 分子式:C16H14F3N3O2S 度:98.0%
小鼠素(Renin)ELISAKit Fexofenadine 153439-40-8 分子式:C32H40ClNO4
小鼠廋素受體 英文名稱: Leptin receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Leptin R Labetalol 中文名: 分子式:C19H25ClN2O3
小鼠廋素 英文名稱: Leptin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Leptin Labetalol 中文名: 分子式:C19H25ClN2O3 度:98.0%
小鼠松弛素 英文名稱: Mouse Relaxin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: RLN Latinone 79157-36-1 中文名: 分子式:C22H16O5
蕓香糖苷 HPLC≥98% 5mg 魚類受精卵細(xì)胞凍存試劑盒(低溫)50
丁香三環(huán)烷二醇 HPLC≥98% 5mg MouseInsulin,INSELISAKit小鼠胰島素(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁香酸甲酯 HPLC≥98% 5mg 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit
豆甾, 二烯– 酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測試劑盒MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 96T/48T
豆甾烯,二酮 HPLC≥98% 5mg 人肌酐(Cr)試劑盒 Human Creatinine,Cr ELISA kit
豆甾,二烯醇 HPLC≥98% 5mg RatcoagulationfactorⅫ,FⅫELISAKit大鼠Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豆甾醇葡萄糖甙 HPLC≥98% 5mg 10倍0酸平衡鹽(PBS)緩沖溶液(0.1M)500毫升
豆甾烷,二醇 HPLC≥98% 5mg MouseCompleme4,C4ELISA試劑盒小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豆甾烷,二酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(PROCR)ELISA試劑盒 ,英文名: PROCR ELISA Kit
杜鵑醇 HPLC≥98% 5mg 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T
通用型雞傳染性喉氣管炎(ILT)基因檢測試劑盒
通用型雞產(chǎn)蛋下降綜合征(EDS)基因檢測試劑盒
通用型雞新城疫(Newcastle Disease Virus;NDV)
通用型雞病毒性關(guān)節(jié)炎呼腸孤病毒(Reovirus;REO)基因
通用型雞傳染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease/Gumboro Disease;IBD)基因檢測試劑盒
產(chǎn)氣腸桿菌探針法PCR熒光定量檢測試劑盒體液脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
細(xì)菌脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
細(xì)胞脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
組織脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒