注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育詳細描述:
產品名稱:陰溝腸桿菌探針法PCR熒光定量檢測試劑盒
英文名稱:Enterobacter cloacae
貨號:BJ-P9521
規格:50T
分類:熒光定量PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用方法: 產品僅用于科研
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶elisa試劑盒 小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶試劑盒、小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 中文名: 分子式:C13H16O5 度:98.0%
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 L 231277-92-2 中文名:拉帕替尼 分子式:C29H26ClFN4O4S 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISAKit L-(+)-Arginine 中文名:L-(+)-精 分子式:C6H14N4O2 度:98.0%
小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISAKit Erlotinib 中文名:鹽酸埃羅替尼 分子式:C22H24ClN3O4
小鼠水通道蛋白elisa試劑盒 小鼠水通道蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠水通道蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠水通道蛋白試劑盒、小鼠水通道蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Ketoprofen 中文名: 分子式:C16H14O3 度:99.0%
短葉老鶴草素 A HPLC≥98% 5mg 犬N端前腦素(-proBNP)試劑盒 Canine N-terminal pro-brain naiuretic peptide,-proBNP ELISA Kit
短葉松素 HPLC≥98% 5mg 英文名稱HumanCPAFELISAKIT人沙眼衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規格:96T/48T
鵝掌揪內酯 HPLC≥98% 5mg 蛋白飽和溶液1毫升
恩鐮孢菌素B HPLC≥98% 5mg Ratmajorbasicprotein,MBPELISA試劑盒大鼠主要堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
二羥丙A HPLC≥98% 5mg 小鼠血管內皮生長因子受體3(VEGFR3)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGFR3 ELISA Kit
二羥丙B(細胞) HPLC≥98% 5mg 兔子神經營養因子3(-3)ELISA檢測試劑盒rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 96T/48T
二氫赤松素 HPLC≥98% 5mg 犬KI-67抗原(MKI67)試劑盒 Dog aigen KI-67,MKI67 ELISA kit
二氫尼洛替星 HPLC≥98% 5mg 英文名稱Huma3ELISAKit人三甲狀腺原(T3)ELISAKit規格:96T/48T
二氫桑色素 HPLC≥98% 5mg 蛋白變性液10毫升
二氫愈創木脂酸 HPLC≥98% 5mg RatmajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/AgBⅠ/H-1ⅠELISA試劑盒大鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/AgBⅠ/H-1Ⅰ)ELISA試劑盒規格:96T/48T
通用型雞傳染性支氣管(Infectious Bronchitis Virus;IBV)
通用型禽霍亂(Pasteurella multocida;PM)基因檢測試劑盒
通用型禽病毒性肺炎(Avian Pneumovirus;APV)
通用型禽白血病A/B/C亞型(ALV-A/B/C)基因檢測試劑盒
通用型禽白血病J亞型(avian leukosis virus subgroup J;ALV-J)
陰溝腸桿菌探針法PCR熒光定量檢測試劑盒體液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
細菌脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
細胞膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒
組織膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒
食物膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建