人重組AP1 (c-Jun)
名稱 | 規(guī)格 | 價格 | 手冊 |
人重組AP1 (c-Jun) | 50fpu | 詢價 |
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c-Jun 是由人原癌基因c-jun 編碼的蛋白。它的表達很大程度上受諸如佛波酯及生長因子處理等細(xì)胞外刺激的調(diào)控。它是AP1家族的一員。在眾多細(xì)胞類型中,AP1的活性主要由Jun和Fos異型二聚體構(gòu)成,其次由Jun 同型二聚體構(gòu)成,人重組AP1 (c-Jun)如HeLa 細(xì)胞。在體外,Jun 同型二聚體和AP1 位點結(jié)合并激活轉(zhuǎn)錄。本產(chǎn)品是以人的cDNA克隆在大腸桿菌中表達獲得,分子量為40kDa。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細(xì)胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質(zhì)分離,并將RNA釋放到溶液中。當(dāng)加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,人重組AP1 (c-Jun)離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復(fù)性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離,當(dāng)以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時,變性的質(zhì)粒DNA又恢復(fù)原來的構(gòu)型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復(fù)性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),通過離心,染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物等一起沉淀下來而被除去。
人重組AP1 (c-Jun)相關(guān)產(chǎn)品列表:
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兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA Kit
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