組氨酸標簽蛋白染色試劑盒
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組氨酸標簽蛋白染色試劑盒 | 10次 | 詢價 |
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本產品為His標簽蛋白染色試劑盒，它具有下列特點：
1. 比蛋白免疫印跡法快兩到三倍，可以更快地得到結果并且節省珍貴的研究時間。2. 可直接在膠上檢測，無需進行轉膜和蛋白質免疫印跡卻可以檢測僅有0.2微克的6x組氨酸標簽蛋白。
3. 即用，含兩種試劑配方 – 無需混合、無需稀釋；確保了一種簡單易行、操作無錯誤的檢測方法。
4. 用于單獨、特異地檢測6x組氨酸標簽蛋白的熒光檢測方法 –檢測您希望檢測的目的蛋白（CCD照相方法可以檢測到低豐度蛋白，UV透射方法可以檢測大量的標簽蛋白）。
5. 與各種藍色染色試劑兼容，可以特異染色6x組氨酸標簽蛋白并且可在此后利用藍色染色試劑進行總蛋白染色。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
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