動植物膜蛋白微量制備試劑盒
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動植物膜蛋白微量制備試劑盒 | 50次 | 490元 |
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細胞膜蛋白質參與了很多重要的細胞活動,根據它們與膜結合的位置一般分為兩種,一種是附著在細胞膜上,另一類是嵌入到細胞膜中間。附著型膜蛋白疏水性較弱,比較容易提取和純化;而嵌入型膜蛋白疏水型很強,所以在水溶液里面很難溶解,非常難以提取和純化。LMAI Bio基因根據上述特點,經過精心優化的、開發出專門用于分離純化這兩種膜蛋白的兩款產品,它們具有下列特點:
1. 兩步法提取,即先純化細胞膜,再純化膜蛋白,其他成分(核酸和其他蛋白質)污染較少,膜蛋白純度遠高于總蛋白提出(注意:總蛋白提取得到的蛋白質中也有膜蛋白)。
2. A型適用于附著型膜蛋白,B型適合于整合型膜蛋白。
3. 含多種增溶劑,能使各種膜蛋白都能很好地溶解在水溶液中。
4. 既適用于原核細胞,也適用于真核細胞,既適用于培養細胞,也適用于組織細胞。
RNA提取法:試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚,其中異硫氰酸胍可裂解細胞,促使核蛋白體的解離,使RNA與蛋白質分離,并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA進入水相,離心后可形成水相層和有機層,這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA,有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟:
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA,再以cDNA為模板,擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中,每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂,但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離,當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時,變性的質粒DNA又恢復原來的構型,保存在溶液中,而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構,通過離心,染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關產品列表:
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分子生物學級糖原溶液,10mg/mL
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