WB600枯草桿菌
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WB600枯草桿菌 | 1 管 | 詢價 |
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WB600菌株是來源于BS168的變異，是蛋白酶缺陷型菌株，敲除了6個蛋白酶基因。含紅霉素抗性基因。轉(zhuǎn)化方法簡單、便捷，金黃色葡萄球菌帶有抗性基因的質(zhì)粒可作為其載體，菌株沒有致病性。細胞壁的組成簡單，只含有肽聚糖和磷璧質(zhì)，因此在分泌的蛋白質(zhì)產(chǎn)品中不會混雜有胞被內(nèi)毒素（熱源性脂多糖）。蛋白純化簡單，多用于蛋白表達。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質(zhì)分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質(zhì)和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質(zhì)。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產(chǎn)物的電泳和結(jié)果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質(zhì)粒DNA是基于染色體DNA與質(zhì)粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開而變性。質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環(huán)狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調(diào)節(jié)其pH至中性時，變性的質(zhì)粒DNA又恢復原來的構(gòu)型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，通過離心，染色體DNA與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關(guān)產(chǎn)品列表：
ROX參考染料II
cDNA*鏈合成試劑盒
cDNA*鏈合成試劑盒
AMV cDNA*鏈合成試劑盒
miRNA cDNA*鏈合成試劑盒
miRNA熒光定量檢測試劑盒
cDNA第二鏈合成試劑盒
一管式雙鏈cDNA合成試劑盒
Oligo dT12-18引物
6 nt隨機引物
10 nt隨機引物
6nt隨機引物（抗水解）
兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)
兩管式RT-PCR試劑盒（AMV-Taq）
單酶一管式RT-PCR試劑盒（Tth）
雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)
一步式RT-PCR Mix
免RNA提取RT-PCR試劑盒
即用型熒光定量RT-PCR試劑盒
即用型熒光定量RT-PCR試劑盒
通用型全基因組擴增試劑盒
單細胞全基因組擴增試劑盒
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒
單孢子全基因組擴增試劑盒
