一步法96孔板單菌落質粒DNAout（離心法）
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
一步法96孔板單菌落質粒DNAout（離心法） | 1次 | 詢價 |
|
本產品是在LMAI Bio一步法質粒DNAOUT（CAT#：70301）基礎上開發的、能夠一次性地從96個單個菌落快速提取質粒DNA的產品。本產品具有下列特點：
1. 高通量，一次可以96個單個菌落中提取質粒DNA。
2. 不需要過夜培養細菌，能為研究人員節約一天的寶貴時間。
3. 快速，整個過程只需要不到20分鐘。
4. 一步法裂解細菌，不使用強堿溶液，對DNA損傷小。
5. 得到的質粒DNA足夠1-2次電泳或酶切實驗，足夠多次PCR、測序和細菌轉化實驗。
6. 適用于高拷貝、中拷貝和低拷貝質粒。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關產品列表：
pBI 221-GFP
pBI Tet
pBI121-GFP
pBiFC-bFos（ΔZIP）VC155
pBiFC-bFosVC155
pBiFC-bJunVN173
pBiFC-bJunVN55(I152L)
pBiFC-CrN173
pBiFC-CC155
pBiFC-VC155
pBiFC-VN173
pBiFC-VN155(I152L)
