96孔板質粒DNAout（離心法）
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96孔板質粒DNAout（離心法） | 1次 | 詢價 |
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本產品是基于經典堿變法的高通量質粒DNA提取試劑盒，一次可以處理多達96個樣品，尤其適合處理量大的工業客戶，包括測序公司。本產品的主要特點是：
1. 高通量，一次處理96個樣品。
2. 吸附量高，一個吸附孔多可以吸附30-50 μg的質粒DNA。
3. DNA純度高，幾乎沒有基因組DNA和RNA污染，OD260/280一般在1.7-1.9之間，*能滿足一般分子生物學的要求。
4. DNA可以直接用于電泳、酶切、PCR、細菌轉化、分子克隆等實驗。
5. 重復性和穩定性好。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關產品列表：
Ammonium Chloride（氯化銨溶液）, 0.5M
Ammonium Persulfate Solution（過硫酸銨溶液），10%
Ammonium Sulfate Solution(硫酸銨溶液）,1M
Ammonium Sulfate Solution, Saturated(飽和硫酸銨溶液）
AMP Buffer，0.5M，pH10.0
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