96孔板血液DNAout（真空法）
名稱 | 規格 | 價格 | 手冊 |
96孔板血液DNAout（真空法） | 5次 | 6詢價 |
|
本產品是基于離心柱/硅膠膜DNA吸附原理的、專門用于高通量、快速地從新鮮或冷凍的動物（包括人和禽類）抗凝全血中提取基因組DNA的試劑，它具有下列特點：
1. 一次可以同時處理96個樣品，每個樣品的體積在0.2-1 mL之間。
2. 產率高，一般為20-60 μg/mL全血（對哺乳動物血液）。
3. DNA純凈，OD260/280在1.8-2.0之間。不含蛋白質和RNA污染，可直接用于PCR、酶切、Southern雜交等實驗。
4. 操作簡單，整個過程約20分鐘，全室溫操作，適合大規模樣品處理。
5. 安全無毒，本試劑盒不使用苯酚和，對人體無毒，無腐蝕性和刺激性氣味。
6. 本產品也可用于禽類血液等非哺乳動物血液。
RNA提取法：試劑中的主要成分為異硫氰酸胍和苯酚，其中異硫氰酸胍可裂解細胞，促使核蛋白體的解離，使RNA與蛋白質分離，并將RNA釋放到溶液中。當加入氯時，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA進入水相，離心后可形成水相層和有機層，這樣RNA與仍留在有機相中的蛋白質和DNA分離開。水相層(無色)主要為RNA，有機層(黃色)主要為DNA和蛋白質。
實驗步驟：
1、RNA的提取;
2、反轉錄合成cDNA;
3、PCR擴增;
4、產物的電泳和結果的測定。
RT-PCR是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用從RNA合成 cDNA，再以cDNA為模板，擴增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或兩步法的形式進行。在兩步法RT-PCR中，每一步都在zui條件下進行。
堿變性提取質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大部分氫鍵也斷裂，但超螺旋共價閉合環狀的兩條互補鏈不會*分離，當以pH4.8的NaAc高鹽緩沖液去調節其pH至中性時，變性的質粒DNA又恢復原來的構型，保存在溶液中，而染色體DNA不能復性而形成纏連的網狀結構，通過離心，染色體DNA與不穩定的大分子RNA、蛋白質-SDS復合物等一起沉淀下來而被除去。
相關產品列表：
RNase-Free Sodium Chloride Solution（無RNase的氯化鈉溶液）,5M
RNase-Free SSC（無RNase的SSC）,20X
RNase-Free SSPE（無RNase的SSPE）,20X,pH7.4
RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液）,20X，pH7.4
RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液）,20X，pH7.6
RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液）,20X，pH8.0
RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液），pH7.4
RNase-Free TE Buffer（無RNase的TE緩沖液），pH7.6
