中文名稱：miRNA第一鏈cDNA合成(莖環(huán)法)
英文名稱：miRNAFirst Strand cDNA Synthesis (Stem-loop Method)
產(chǎn)品規(guī)格：10 RXNS|20 RXNS
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164290
產(chǎn)品介紹：
儲存條件：冷凍（-20℃） 概述 本試劑盒采用莖環(huán)結(jié)構(gòu)的逆轉(zhuǎn)錄引物與miRNA分子的3’端結(jié)合，并在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下進行反應，獲得人為加長的miRNA鏈cDNA。獲得的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物可直接用于后續(xù)的染料法或探針法熒光定量檢測。此方法特異性高只對成熟的miRNA進行反轉(zhuǎn)，不受其前體干擾，序列高度同源的miRNA也可精確區(qū)分。2×濃縮的預混溶液和預混酶使用更方便，大大簡化操作過程，縮短操作時間，降低污染。 特點 特異性的莖環(huán)引物，只對成熟的miRNA進行反轉(zhuǎn)，不受其前體干擾，序列高度同源的miRNA也可精確區(qū)分。 逆轉(zhuǎn)錄效果更好，檢測更靈敏。 適用于探針法檢測。 2×濃縮的預混溶液和預混酶使用更方便。 應用 miRNA基因表達分析 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
pCAMBIA＋目的基因
pZERO＋目的基因
動物組織S9組分分離試劑盒
動物組織微粒體組分分離試劑盒
正常男性人體肝組織S9組分（5毫克/毫升）
香荊芥酚（標準品） 5-Isopropyl-2-methylphenol 質(zhì)量規(guī)格：供含量測定用 英文名稱Mouset-PAELISAKit小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)規(guī)格：96T/48T
十七碳酸甲酯（標準品） METHYL HEPTADECANOATE 質(zhì)量規(guī)格：內(nèi)標 pBADCE4.1+目的基因雙基因真核表達
鴨腳樹葉堿（標準品） 2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢelisa豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)elisa規(guī)格：96T/48T
6-羥基-7-甲氧基（標準品） 6-HYDROXY-7-METHOXYCOUMARIN 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠鈣網(wǎng)蛋白(C)elisa ，英文名： C ELISA Kit
苦玄參苷IA（標準品） PIEFELTARRAENIN A 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA檢測試劑盒HumanNuclearmaixprotein22,NMP-22ELISAKit 96T/48T
番茄堿（標準品） Tomatidine 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品 大鼠三甲腺原(T3)抗體試劑盒 Rat i-iodothyronine(T3)aibody ELISA kit
樟腦（標準品） (-)-CAMPHOR 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 英文名稱RatTATELISAKit大鼠-抗復合物(TAT)規(guī)格：96T/48T
11-羰基-β-乙酰乳香酸（標準品） 3-ACETYL-11-KETO-BETA-BOSWELLIC ACID 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 活體組織氧化應激活性氧(ROS)初級綠色熒光測定試劑盒40/100
3',4',5',5,7-五甲氧基黃酮（標準品） 3',4',5',5,7-PENTAMETHOXYFLAVONE 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 ELISAKitCYP21B人P450c21B/21-羥化酶規(guī)格：48T/96T
金橙II（標準品） OrangeΙΙ 質(zhì)量規(guī)格：檢查 小鼠鈣通道阻滯劑(CCB)elisa ，英文名： CCB ELISA Kit
miRNA第一鏈cDNA合成(莖環(huán)法)N-去甲基昂丹司瓊 N-Demethyl Ondansetron 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanS100ELISAKit人S100ELISAKit規(guī)格：96T/48T
6-羥基昂丹司瓊 6-Hydroxy Ondansetron 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumansCD86ELISAKit人sCD86(sCD86)elisa規(guī)格：96T/48T
8-羥基昂丹司瓊 8-Hydroxy Ondansetron 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanSDF-1—Somalcellderivedfactor1ELISAkit人基質(zhì)衍生因子-1B(SDF-1β)ELISAkit規(guī)格：96T/48T
奧昔康唑 Oxiconazole 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanSerotonin5-HydroxyyptamineELISAKit人5-羥色氨(5-HT)elisa規(guī)格：96T/48T
土半鈣鹽 Oxytetracycline hemicalcium salt 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanSerumamyloidAELISAKit人血清淀粉樣蛋白A(SAA)規(guī)格：96T/48T
β-Apo-土 β-Apo-oxytetracycline 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumansE-selectin[CD-62E]ELISAKit人可溶性E-選擇素(sE-selectin[CD-62E])規(guī)格：96T/48T
α-Apo-土 α-Apo-oxytetracycline 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanSHBGELISAKit人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)規(guī)格：96T/48T
二水合土 Oxytetracycline Dihydrate 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumansICAM-1ELISAKit人可溶性細胞間粘附分子-1(sICAM-1)elisa規(guī)格：96T/48T
4-差向土 4-Epioxytetracycline 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanSolubleCD30ligandELISAKit人CD30配體(sCD30L)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
6α-羥基 6α-Hydroxy Paclitaxel 質(zhì)量規(guī)格：美國進口 英文名稱HumanSolubleCD40ligandELISAKit人可溶性CD40配體(sCD40L)ELISAKit規(guī)格：96T/48T
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
