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細胞名稱 人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]*
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 NCI-H460細胞株從一位大細胞肺癌患者的胸水中建立。 細胞表達的p53 mRNA易于檢測,其水平與正常肺細胞相當,未表現出DNA總體結構異常。 角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性,神經絲三聯體蛋白陰性。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(139+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:13;D16S539:9;D18S51:13,15;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:15,18;D5S818:9,10;D7S820:9,12;D8S1179:12;FGA:21,23;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:17
同工酶
染色體
使用權限 A類
人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]*操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]*注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37℃,5%CO2培養。
人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]*美國菌種保藏中心, 又稱美國模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的,非贏利性組織。目前它可以提供各種動植物細胞、標準品、菌株達兩萬多種。ATCC成立于1925年,是世界上zui大的生物資源中心,由美國14家生化、醫學類行業協會組成的理事會負責管理,是一家性、非盈利生物標準品資源中心。ATCC向發布其獲取、鑒定、保存及開發的生物標準品,推動科學研究的驗證、應用及進步 ATCC可以提供以下類別生物標準品:細胞株(3000多種);菌株(15000多種);動植物病毒株(2500多種)以及重組物質等。
大鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒 ,英文名: COL6α1 ELISA Kit
Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP) ELISA Kit 人垂體腺苷酸環化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒
Goatmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/OLAELISAKit 山羊主要組織相容性復合體(MHC/OLA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforC3aELISAKit大鼠補體片斷3a規格:48T/96T
細菌鈣轉試劑盒20次
rabbitTestoterone,ISAKit兔子睪同(T)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)ELISA試劑盒 ,英文名: ALOX12 ELISA Kit
人CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)ELISA檢測試劑盒HumanCCAAT/enhancerbindingproteindeta,C/EBPδELISAKit 96T/48T
大鼠維生素B12(VB12)免疫試劑盒 Rat Vitamin B12,VB12 ELISA Kit
英文名稱RatCA199ELISAKit大鼠胃腸癌標志物(CA199)規格:96T/48T
烘培食物尿素比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitHO-2人血紅素氧合酶2規格:48T/96T
人胃泌素(Gasin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬分泌型免疫球蛋白A(sIgA)免疫試劑盒 Pig secretory immunoglobulin A,SIgA ELISA Kit
HumanIerleukin12,IL-12/P40ELISAKIT 人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanneuronalnuclearaoaibody,ANNA-1/HuELISA試劑盒人抗神經元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA試劑盒規格:96T/48T
組織組蛋白脫乙酰化酶2(HDAC2)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanFibronectin,FNELISAKit人纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒規格:96T/48T
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照)
MEG-01 人成巨核細胞白血病細胞
MSTO-211H人肺癌細胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標簽)
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] 人支氣管成纖維細胞*培養基 100mL
人鼻咽癌細胞;CNE-2Z
AGRP Others Mouse 小鼠 AGRP / AgRP 人細胞裂解液 (陽性對照)
MEG-01 人成巨核細胞白血病細胞
MSTO-211H人肺癌細胞株 Human lung cancer cell line MSTO-211H RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
MIF Protein Human 重組人 MIF / GLIF 蛋白 (His 標簽)
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38] 人支氣管成纖維細胞*培養基 100mL
人大細胞肺癌細胞;NCI-H460 [H460]*人內殼細胞(HHirSC)( 5×105 )
人癌細胞;MCF 7B
CL-0447SW 1353(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
人細胞;Hela 229 [HeLa229] 大鼠主動脈平滑肌細胞*培養基 100mL
P815 小鼠肥大細胞癌細胞
PI3 Others Human 人 Elafin / WFDC14 / appin-2 人細胞裂解液 (陽性對照)