生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細(xì)小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
中文名稱：病毒RNA提取試劑盒
英文名稱：RNAtiqu Virus RNA Extraction Kit
產(chǎn)品規(guī)格：50次
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號(hào)：BJ-F0163219
產(chǎn)品介紹：
?本試劑盒采用可以特異性結(jié)合病毒RNA的吸附柱和*的緩沖液系統(tǒng)，適用于從血清、血漿、尿液、腦脊液等無細(xì)胞體液及細(xì)胞培養(yǎng)上清液中分離病毒RNA。病毒RNA特異性地結(jié)合到硅基質(zhì)膜上，而污染物則流過該膜。通過兩次高效洗滌*去除蛋白質(zhì)等雜質(zhì)，然后用無RNase的水或試劑盒提供的RNase-Free Water洗脫高純度的病毒RNA。由本試劑盒提取的病毒RNA可直接用于RT-PCR、Real-time RT-PCR和印跡分析等實(shí)驗(yàn)。 自備試劑：無水乙醇，0.9% NaCl。 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng)： 1、向蛋白酶K 中加入1.25ml 蛋白酶K 儲(chǔ)存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時(shí)間室溫放置，避免反復(fù)凍融，以免影響其活性。 2、預(yù)防RNase污染，應(yīng)注意以下幾方面： 1)使用無RNase的塑料制品和槍頭，避免交叉污染。 2)玻璃器皿應(yīng)在使用前于180℃高溫下干烤4小時(shí)，塑料器皿可在0.5M的NaOH中浸泡10分鐘，用水*沖洗后高壓滅菌。 3)配制溶液應(yīng)使用無RNase的水。 4)操作人員戴一次性口罩和手套，實(shí)驗(yàn)過程中要勤換手套。 3、血清或血漿避免反復(fù)凍融導(dǎo)致蛋白變性或產(chǎn)生沉淀，減少病毒滴度進(jìn)而影響提取病毒核酸的產(chǎn)量。 4、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明先在Buffer RW2中加入無水乙醇。 5、Buffer GL如果產(chǎn)生沉淀，可在56℃加熱使其溶解后室溫放置。 6、所有離心步驟若無特殊說明均在室溫下進(jìn)行，且所有操作步驟動(dòng)作要迅速。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運(yùn)送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá)，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時(shí)間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時(shí)不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
組織一氧化氮合成酶總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
血液一氧化氮合成酶總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
尿液一氧化氮合成酶總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
組織結(jié)構(gòu)型神經(jīng)元一氧化氮合成酶（cNOS/NOS1/nNOS）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
兔透明質(zhì)酸(HA)elisa 5-Benzyl L-glutamate 中文名：L-谷5-芐酯 分子式：C12H15NO4 度：98.0%
兔銅藍(lán)蛋白(CP)elisa 5-Benzyl L-glutamate 中文名：L-谷5-芐酯 分子式：C12H15NO4
兔糖化血紅蛋白A1celisa 兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔糖化血紅蛋白A1c試劑盒、兔糖化血紅蛋白A1c elisa 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷-5-芐酯 分子式：C17H23NO6 度：98.0%
兔糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISAKit 4-Bromomethyl-2-cyanobiphenyl 中文名： 分子式：C14H10BrN
兔胎盤生長因子elisa 兔胎盤生長因子試劑盒 規(guī)格型號(hào)：96T/48T 兔胎盤生長因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔胎盤生長因子試劑盒、兔胎盤生長因子elisa 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 5-Benzyl N-(tert-butoxycarbonyl)-L-glutamate 中文名：N-(叔丁氧羰基)-L-谷-5-芐酯 分子式：C17H23NO6
病毒RNA提取試劑盒毒莠定(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%) Picloram 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 英文名稱RatTumornecrosisfactorβELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子β(TNFβ)規(guī)格：96T/48T
嘧霉胺(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%) Pyrimethanil 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% 肝素(heperin)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20
甜菜寧(分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%) Phenmedipham 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% ELISAKitPROG人激素/同規(guī)格：48T/96T
甲霜靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%) Metalaxyl solution 質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6% 小鼠跨膜蛋白97(TMEM97/MAC30)elisa ，英文名： TMEM97/MAC30 ELISA Kit
氯草定 Nitrapyrin 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAngiopoietin2,ANG-2ELISAKit 96T/48T
丙磷 Profenofos 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP-1)試劑盒 Human LRP-1 ELISA Kit
吡丙醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%) Pyriproxifen 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5% RatNuclearfactor-kappaB,NF-κBELISAKit大鼠核因子κB(NF-κB)elisa規(guī)格：96T/48T
(0.105mg/ml) Phenthoate solution 質(zhì)量規(guī)格：0.105mg/ml FITC標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升
敵稗標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml) Propanil solution 質(zhì)量規(guī)格：0.100mg/ml Mouseserine/threonineproteinkinase,STKelisa小鼠絲/蘇蛋酸酶(STK)elisa規(guī)格：96T/48T
伏殺硫磷 Phosalone 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠跨膜蛋白27(TMEM27)elisa ，英文名： TMEM27 ELISA Kit
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
