操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。 7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。 8、結果分析
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱：革蘭氏陽性菌質粒提取試劑盒(1～4mL)
英文名稱：Gram+ Bacteria Plasmid extraction kit(1-4mL)
產品規格：50次
發貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0163394
生物醫學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點，本公司開發了本產品。
產品介紹：
本試劑盒用于從革氏陽性細菌小量制備質粒DNA。本產品基于改良后的堿變性法，先菌體經破壁，然后堿裂解法處理使基因組DNA和質粒DNA均變性，再用酸中和，質粒DNA客戶快速復性，而基因組DNA不能快速復性，故可以通過離心去除，除去后含質粒的上清用離心吸附柱吸附質粒DNA，洗去雜質，即可得到純化的質粒DNA。 試劑盒特點： 快速、步驟少，整個操作在40分鐘左右完成。 不需要預平衡離心吸附柱。 通用洗柱液即開即用，不需要用戶額外加乙醇。 溶液B中有藍色染料，便于目測非常關鍵的堿變性和中和反應兩步的溶液混勻狀況，保證實驗效果。 產量高，一次可以處理1～4mL過夜培養的G+菌液，每毫升過夜培養的G+細菌可以提取到2～5μg/mL（取決于質粒是高拷貝、中拷貝還是低拷貝）。 純度高，采用本試劑盒提取的質粒OD比值在1.8～2.0之間，可以直接用于酶切、轉化、測序及PCR等。 保存條件： 常溫運輸和保存，RNase A溶液需要-20℃保存，有效期一年。 使用方法： 從篩選平板上挑取單菌落至含抗生素的培養基中，37℃震蕩培養12～16小時（搖床轉速200-300）。注意：建議使用LB培養基，營養更豐富的培養基會使菌體濃度過高，過純化系統處理能力而降低DNA質量。另外，延長培養時間會因細胞死亡、裂解而造成質粒DNA濃度降低。 用1.5mL離心管收集1～4mL過夜培養飽和菌液，室溫12000rpm離心1分鐘，棄上清，再短暫離心，吸棄殘留液體。 次使用本試劑盒時，先將全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，搖勻后再取用，未用完的溶液A放4℃保存。 加入250μL溶液A，用槍頭充分吹打使菌體重懸。注意：細胞未充分懸浮會影響后續堿變性，可以使用漩渦振蕩器混勻或使用槍頭吸頭吹打沉淀至*混勻。 加入大約5mg干粉（用0.1mg精度的分析天平稱量），輕柔顛倒混勻后室溫放置10分鐘破裂細胞壁。 加入250μL溶液B（如果溶液B在低溫放置產生沉淀，須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用），溫和反復顛倒混勻看到溶液的藍色變得均勻并且溶液變粘即可（一般需要顛倒4～6次），然后冰上放置不過5分鐘。注意：冰上放置不要過5分鐘，否則質粒DNA會有堿損傷。千萬不要劇烈振蕩，否則基因組DNA斷裂產生的片段非常容易污染質粒DNA。溶液B用后需要將蓋擰緊存放，否則空氣中的二氧化碳會進入溶液，形成碳酸，中和溶液B中的堿，降低其效率。如果溶液B顏色不是藍色，則表示變質，應該棄之不用并且速跟聯系。 加入350μL冰上預冷的溶液C，溫和反復顛倒直到溶液顏色變成無色（一般需要顛倒混勻4～6次）。混勻后可見白色沉淀物產生，然后冰上放置至少5分鐘讓質粒DNA復性。 12000rpm離心3分鐘，小心將上清液轉移到離心吸附柱中。由于此時的溶液比重較大，部分沉淀物懸浮在上清液中屬正常，吸取上清時避開漂浮的沉淀物即可。如果此步的離心在4℃進行，可減輕沉淀物漂浮。 靜置2分鐘以讓質粒DNA與離心吸附柱充分結合，保證靜置不少于2分鐘十分重要。 室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中的廢液。 加入500μL的通用洗柱液到離心吸附柱中，室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中廢液。注意：通用洗柱液中含乙醇，每次用后需要將蓋擰緊存放，否則乙醇會揮發。 重復上步1次。 室溫12000rpm離心1分鐘，甩干殘留液體。此步不能省略，否則殘留乙醇會影響DNA的后續使用（如殘留乙醇使DNA溶液在電泳上樣時不能沉淀到加樣孔中）。 將離心吸附柱置于一個新的1.5mL塑料離心管（自備）中，加入30～100μL65～80℃預熱的DNA洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。常溫的DNA洗脫液2.0也可以用于洗脫，但產量稍微有所降低。 室溫12000rpm離心1分鐘，離心管底溶液即質粒DNA。 由于的吸附柱結合DNA能力較，如果再加適量DNA洗脫液2.0到離心吸附柱中，往往還能洗脫下很多質粒DNA（相當于次洗脫的20～30%），但注意不要使用上步得到的DNA洗脫液2.0來洗脫。 |
使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
植物丙二醛（MDA）比色法定量檢測試劑盒
丙二醛（MDA）終點比色法定量檢測試劑盒
總抗氧化能力（TAC）終點比色法定量檢測試劑盒
氧陰離子自由基終點比色法定量檢測試劑盒
細胞一氧化氮（NO）活性比色法定量檢測試劑盒
兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 2,2-Diphenylglycine 中文名： 分子式：C14H13NO2 度：98.0%
兔組織因子elisa 兔組織因子試劑盒 規格型號：96T/48T 兔組織因子試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa（進口分裝），產品別名：兔組織因子試劑盒、兔組織因子eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。 Allopurinol 315-30-0 中文名： 分子式：C5H4N4O 度：98.0% 關鍵詞：
兔組織因子 英文名稱： Rabbit Tissue Factor 規格： 48T/96T 英文縮寫： TF Allitol 488-44-8 中文名：蒜糖醇 分子式：C6H14O6 度：% 關鍵詞： 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫
兔組織金屬蛋白酶抑制因子1 英文名稱： Rabbit Tissue Inhibitor of Metalloproteinases 1 規格： 48T/96T 英文縮寫： TIMP-1 Allitol 488-44-8 中文名：蒜糖醇 分子式：C6H14O6
兔子組織因子(TF)elisa Allyl cinnamate 1866-31-5 中文名：肉桂酸烯丙酯 分子式：C12H12O2
革蘭氏陽性菌質粒提取試劑盒(1～4mL)鄰羥基苯乙酮(>99%,BR) 2-Hydroxyacetophenone 質量規格：>99%,BR 英文名稱HumanCCL26ELISAKit人CCL26規格：96T/48T
2-異丙基咪唑(>98%,BR) 2-Isopropylimidazole 質量規格：>98%,BR 發酵液三醇比色法定量檢測試劑盒20
2-萘乙酸(植物激素級) 2-NAA, 2-Naphthaleneacetic acid 質量規格：>98%,植物激素級 ELISAKitLTBP2人組織內轉化生長因子β結合蛋白2規格：48T/96T
2-萘甲醛(>98%,BR) 2-Naphthaldehyde 質量規格：>98%,BR 小鼠黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM1)elisa ，英文名： MAdCAM1 ELISA Kit
乙酸-2-萘酯(>98%,BR) 2-Naphthyl acetate 質量規格：>98%,BR 人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA檢測試劑盒Human5-hydroxyindolaceticacid,5-HIAAELISAKit 96T/48T
3,4,5-三甲氧基肉桂酸(>98%,BR) 3,4,5-Trimethoxycinnamic acid 質量規格：>98%,BR 大鼠抑制素結合蛋白(INHBP)試劑盒 Rat Inhibin binding protein,INHBP ELISA Kit
藜蘆醛(>99%,BR) 3,4-Dimethoxybenzaldehyde 質量規格：>99%,BR 英文名稱HumanCCL24ELISAKit人CCL24規格：96T/48T
3-羥基(>98%,BR) 3-Hydroxybenzaldehyde 質量規格：>98%,BR 非哺乳動物封阻緩沖液100毫升
間羥基肉桂酸(>98%,BR) 3-Hydroxycinnamic acid 質量規格：>98%,BR ELISAKitTPA人組織多肽抗原規格：48T/96T
4,4-二羥基二苯砜(>98%,BR) 4,4-Dihydroxydiphenyl sulfone 質量規格：>98%,BR 小鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)elisa ，英文名： NOX4 ELISA Kit
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
