操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱：內(nèi)毒素清除試劑盒
英文名稱：Endotoxin removing Kit
產(chǎn)品規(guī)格：1.5mL
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0163416
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒使用的是一類高效內(nèi)毒素清除樹脂，它以修飾過的B(PMB)為配體，進行特異性的內(nèi)毒素清除。經(jīng)此專用親和介質(zhì)純化，樣品終的內(nèi)毒素水平可低于0.1 EU/mL。 細菌內(nèi)毒素(脂多糖，LPS)是革蘭氏陰性細菌細胞壁的主要成分。人們在研究革蘭氏陰性菌血癥和內(nèi)毒素血癥的過程中，發(fā)現(xiàn)細菌內(nèi)毒素在其中起著關(guān)鍵的作用，內(nèi)毒素使機體免疫功能嚴重受損，進一步的發(fā)展可能引發(fā)膿毒性休克，彌散性血管內(nèi)凝血，急性呼吸窘迫綜合癥，全身炎癥反應(yīng)綜合癥或致命性多器官功能衰竭。因此，內(nèi)毒素的清除對于人類疾病治療的注射型藥品、生物制品等都是必須的，尤其對于基因藥物、蛋白藥物、單抗克隆藥物、治療性疫苗、小分子化學藥物等生物制品的下游純化處理來說就顯得非常重要。 試劑盒特點： 1.高穩(wěn)定性，高去除效率。 2.高結(jié)合力：> 2000,000 EU/mL。 3. pH范圍為5-10時，親和介質(zhì)對內(nèi)毒素的清除率在92%以上；pH值在7-8時，清除效率高。 4. 無需恒流泵即可調(diào)節(jié)流速。 5. 重復使用 5次不會改變柱子效果。 6. 使用方便，試劑盒中提供無熱原緩沖液，無熱原收集管及無熱原槍頭等。 7.適合純化對象為蛋白，多肽，抗體，多糖等。 8.可耐受試劑：20% DMSO，20% 乙醇，20% 甘油;1 M 尿素，300mM咪唑; 0.05% 吐溫-20，10mM DTT等。 儲存條件：常溫運輸，4℃保存，有效期一年。 使用方法： 1.樣品處理：樣品的pH值和離子度在內(nèi)毒素去除的過程中起著重要作用。雖然結(jié)合內(nèi)毒素的pH范圍在6-9，但是7-8的pH范圍是純化的佳范圍。合適的離子濃度可以降低非特異性吸附，0.15-0.5 M NaCl的條件可以得到一個很好的去除效率和低的樣品損失。所以，純化之前可以使用處理過的氯化鈉，0.1 M的氫氧化鈉或0.1 M鹽酸來調(diào)節(jié)離子度或pH值。 2.活化親和介質(zhì)：將預裝柱置于鐵架臺，垂直固定，去除預裝柱頂部的蓋子，打開流速控制器，使保護液在重力作用下流干，加入5mL的(預冷)再生緩沖液，調(diào)節(jié)流速控制器，保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min)，待再生緩沖液流干，再加入5mL 再生緩沖液，再重復操作兩次，確保體系保持無熱原(即內(nèi)毒素)存在。即使是次使用也必須進行這一步操作。這步操作大約需要60分鐘完成。 3. 平衡親和介質(zhì)：活化完畢后，加入6mL的(預冷)平衡緩沖液，調(diào)節(jié)流速控制器，保持流速在0.5mL/min，流干平衡緩沖液，再按此操作重復兩次。這步操作大約需要40分鐘完成。 4.內(nèi)毒素清除：將流速控制器關(guān)閉，使用無熱原槍頭將樣品加入，打開控制器，控制流速不高于0.25mL/min，流出液體積達到1.5mL后，使用無熱原接收管接受樣品，樣品流干后，再加入1.5mL-3.0mL的(預冷)平衡緩沖液淋洗，收集淋洗液。檢測樣品濃度及內(nèi)毒素水平。 5. 再次使用：如果流出樣品內(nèi)毒素水平未能達到預期值，需要將預裝柱重新再生，按照步驟1 重新再生，然后上樣純化。 6. 儲存條件：如果預裝柱用完后需要保存，先用10mL 平衡緩沖液平衡柱子，待平衡液流干，加入1.5mL的再生緩沖液(含0.02% |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關(guān)信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
真菌/酵母醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法定量檢測試劑盒
植物醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法定量檢測試劑盒
動物細胞醛酮還原酶1A（aldo-keto reductase 1A）活性比色法定量檢測試劑盒
動物細胞醛酮還原酶1B（aldo-keto reductase 1B）活性比色法定量檢測試劑盒
動物細胞醛酮還原酶1C（aldo-keto reductase 1C）活性比色法定量檢測試劑盒
FDA水解酶試劑盒 可見分光光度法 50管/24樣 4-Amino-3,5-dichloropyridine 22889-78-7 中文名： 分子式：C5H4Cl2N2
E選擇素 英文名稱： Human E selectin 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： ES 3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名： 分子式：C11H13N3S
Ethyleneglycol Oleandrin 465-16-7 中文名： 分子式：C32H48O9
EthidiumBromide(EB) 1ml(10mg/ml) Oleandrin 中文名： 分子式：C32H48O9
EosinY,Salt 10x25g Prednisone 21-acetate 125-10-0 中文名：醋酸 分子式：C23H28O6
內(nèi)毒素清除試劑盒 Propafenone 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISA檢測試劑盒Ratai-Monocyteaibody,AMAELISAKit 96T/48T
呫噸酸 Xanthene-9-carboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 人白介素29(IL-29)試劑盒 Human Ierleukin 29,IL-29 ELISA Kit
呫噸酮 Xanthone 質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法有關(guān)物質(zhì)檢查用 英文名稱MouseTissuefactorELISAKit小鼠組織因子(TF)規(guī)格：96T/48T
Methyl eugenol 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 pBaBe-PURO+MiRNAMiRNA表達
香葉醇 Geraniol 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 Porcineplatelet-derivedgrowthfactor,PDGFelisa豬血小板衍生生長因子(PDGF)elisa規(guī)格：96T/48T
Benzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 小鼠甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)elisa ，英文名： MBL ELISA Kit
卡維丁 Cavidine 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA檢測試劑盒HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 96T/48T
5-羥色胺鹽酸鹽 Serotonin 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 大鼠色羥化酶(TPH)試劑盒 Rat yptophan Hydroxylase,TPH ELISA Kit
Evening primrose oil 質(zhì)量規(guī)格：鑒別 英文名稱RatF1+2ELISAKit大鼠原片段F1+2規(guī)格：96T/48T
龍血素A Loureirin A 質(zhì)量規(guī)格：含量測定 活體細胞組織蛋白酶K(CATHEPSINK)活性原位熒光染色檢測試劑盒20
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
