操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:高純質粒小提試劑盒(1~5mL)
英文名稱:PlasmidPure Mini Kit(1~5mL)
產品規格:200次
發貨周期:1~3天
產品貨號:BJ-F0163409
生物醫學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點,本公司開發了本產品。
產品介紹:
本試劑盒適合提取1~5mL菌液,在堿裂解法裂解細胞的基礎上,采用*的硅基質膜吸附技術和試劑配方,通過離心吸附柱在高鹽狀態下高效專一的結合溶液中的質粒DNA,每個吸附柱高可吸附30μg的質粒DNA,并大限度的去除蛋白質、基因組、RNA和其他雜質。得到的質粒DNA可直接用于細胞轉染、PCR、酶切、測序、連接等生物學實驗。 儲存條件:室溫(15~30℃)。 自備試劑:無水乙醇。 實驗前準備及重要注意事項: 所有組分可在干燥、室溫(15~30℃)環境穩定保存1年,將吸附柱置于2~8℃可保存更長時間,加入RNase A的Buffer P1置于2~8℃可穩定保存6個月。 次使用前,將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混勻,置于2~8℃保存,使用前需在室溫中放置一段時間,恢復至室溫后使用。 次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。 使用前若發現Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復澄清(請勿劇烈晃動Buffer P2)。 注意不要直接接觸Buffer P2、Buffer N3和Buffer PB,使用后應立即蓋緊蓋子。 提取質粒的量和純度與細菌培養濃度、菌株種類、質粒大小、質??截悢档纫蛩赜嘘P。 操作步驟: 取1~5mL過夜培養的菌液加入離心管(自備)中,13000rpm(~16200×g)離心30秒收集菌體沉淀,盡量吸棄上清。 向留有菌體沉淀的離心管中加入250μL Buffer P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮菌體沉淀。 注意:如果菌塊未*混勻,將會影響裂解效果,導致提取量和純度偏低。 向離心管中加入250μL Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻4~6次,充分混勻使菌體裂解,此時溶液應變得清亮粘稠。 注意:溫和混勻,不要劇烈震蕩,以免打斷基因組DNA,造成提取的質粒中混有基因組DNA片段。 此步驟所用時間應不過5分鐘,避免質粒受到破壞。 向離心管中加入350μL Buffer N3,立即溫和地上下顛倒混勻8~10次,充分混勻,此時應出現白色絮狀沉淀。13000rpm離心5分鐘。 注意:Buffer N3加入后應立即混勻,避免產生局部沉淀。 將步驟4中所得的上清液轉移到已裝入收集管的吸附柱DM中,13000rpm離心30秒鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。 向吸附柱中加入150μL Buffer PB,13000rpm離心30秒。 向吸附柱中加入400μL Buffer PW(請先檢查是否已加入無水乙醇),13000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。 將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中,向吸附膜的中間部位加入50~100μL Buffer EB,室溫放置2分鐘,13000rpm離心1分鐘,將質粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質粒。 注意: 1)為了增加質粒的回收效率,可將得到的溶液重新加入到吸附柱中,室溫放置2分鐘,13000rpm離心1分鐘,將質粒溶液收集到離心管中。 2)質??截悢递^低或>10kb時,Buffer EB在65~70℃水浴預熱,可以增加提取效率。 |
使用方法:本產品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內,擰緊蓋,在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達,則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
真菌/酵母細胞亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒
藻類細胞亞硝酸鹽還原酶總活性比色法定量檢測試劑盒
植物鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
真菌/酵母細胞鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
藻類細胞鐵型亞硝酸鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
山羊生長激素釋放多肽elisa 山羊生長激素釋放多肽試劑盒 規格型號:96T/48T 山羊生長激素釋放多肽試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa(進口分裝),產品別名:山羊生長激素釋放多肽試劑盒、山羊生長激素釋放多肽elisa 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)elisa 3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)ELISAKit 3-Benzyl-5-(2-hydroxyethyl)-4-methylthiazolium chloride 4568-71-2 中文名:3-芐基-5-(2-)-4-甲基氯化噻唑鎓 分子式:C13H16ClNOS
山羊 英文名稱: Coisol 規格: 48T/96T 英文縮寫: CO 3-Ethoxya-3,5-dien-17β-ol 26614-48-2 中文名:3-乙氧基雄-3,5-二烯-17β醇 分子式:C21H32O2
山羊內啡肽(EP)elisa 3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2
高純質粒小提試劑盒(1~5mL)D-α-氨基己二酸 D-a-Aminoadipic acid 質量規格:0.97 英文名稱RatinducibleniicoxidesyhaseELISAKIT大鼠誘導型合成酶(iNOS)規格:96T/48T
D-高苯丙 D-Homophenylalanine 質量規格:>90%(T),BR 高效液相色譜(HPLC)分析20樣本
D-焦谷 D-Pyroglutamic acid 質量規格:0.98 ELISAKitOSM人抑瘤素M規格:48T/96T
D-環丙基丙 D-Cyclopropylalanine 質量規格:BR 小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)elisa ,英文名: M-CSF ELISA Kit
D-叔亮鹽酸鹽 D-tert-Leucine 質量規格:BR,98.5% 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA檢測試劑盒RatAquaporin5,AQP-5ELISAKit 96T/48T
D-正纈 D-Norvaline 質量規格:>98%,BR 人催產素(OT)試劑盒 Human oxytocin,OT ELISA Kit
D-苯丙甲酯鹽酸鹽 H-D-Phe-OMe·HCl 質量規格:>99%,BR Raetinol-bindingprotein,RBPELISAKit大鼠醇結合蛋白(RBP)elisa規格:96T/48T
N-乙酰-D-谷 Ac-D-Glu-OH 質量規格:>98%,BR Hollande固著液50毫升
CBZ-D-亮 Z-D-Leu-OH 質量規格:BR,>98%,油狀 MouseVitaminB6,VB6elisa小鼠B6(VB6)elisa規格:96T/48T
D-別異亮 D-allo-Isoleucine 質量規格:0.98 小鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。