操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
商品屬性:
產品名稱:人橫紋肌肉瘤細胞:TE671 subline No.2
貨號:BJ-X96802
規格:1×10?cells/T25培養瓶
分類:細胞系
商品介紹:
名稱 TE671 subline No.2 (人橫紋肌肉瘤細胞) 年齡(性別) 7歲 生長特性 貼壁細胞 細胞形態 上皮細胞樣 背景描述 TE671 subline No.2細胞表達N型乙酰和外周型苯二氮的受體. 生長培養基 DMEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:產品僅用于科研
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
DiOC6(3) 碘化物100mg DNA 電泳分子量標準 (100-1500 bp)50 次
ER-Tracker Red( 內質網紅色熒光探針 )20μL DNA 采樣拭子 50 支
Fluo-3AM( 鈣離子熒光探針 )250μL DNA 包被溶液100mL
Fluo-3,五銨鹽1mg DNA UV 防護劑3g
Fluorescein-5-maleimide25mg DNA Shuffling 試劑盒10 次
倉鼠脂聯素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)elisa檢測試劑盒免費代測
倉鼠載脂蛋白B(APOB)elisa檢測試劑盒
倉鼠血紅素氧合酶1(HO-1)elisa檢測試劑盒
倉鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)elisa檢測試劑盒
倉鼠P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)elisa檢測試劑盒免費代測
人橫紋肌肉瘤細胞:TE671 subline No.2大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)elisa檢測試劑盒
大鼠TAR DNA結合蛋白43(TARDBP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠TAR DNA結合蛋白43(TARDBP)elisa檢測試劑盒
大鼠Tau蛋白elisa分析檢測試劑盒
大鼠Tau蛋白elisa檢測試劑盒免費代測