生物醫學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點,本公司開發了本產品。
中文名稱:PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)
英文名稱:PAGE protein staining kit
產品規格:250ml|1000ml
發貨周期:1~3天
產品貨號:BJ-F0164912
產品介紹:
本試劑盒適用于快速檢測PAGE膠上的微量蛋白質,它的敏感度幾乎可以達到銀染的敏感度(ng級水平或者更高),但是比銀染簡單、穩定、重復性高。染色液所含有的成份和PAGE膠中的SDS、TRIS共同作用形成特殊復合物沉淀在膠基質中形成白色的背景染色。有蛋白的地方,蛋白質的存在干擾這種復合物沉淀的形成,因此蛋白條帶仍舊保持透明無色,在黑色的背景下,就可以清晰見到透明的蛋白條帶。 產品特點: 1.電泳后采用兩個簡單步驟,15分鐘內完成全部過程。 2.環保染料,*不含有各種醋酸、甲醇等有毒有刺激性成份。 3.蛋白條帶為不透明白背景上的透明條帶,靈敏度為傳統方法的10倍以上(納克級或者更高)。 4.可逆染色,*不影響蛋白性質,不影響抗體抗原結合性質。如果需要可以脫色15分鐘后繼續做蛋白電洗脫(切下特定條帶脫色后洗脫下來可以用來做抗原使用)、定量、Western blot實驗、質譜分析、N末端測序等。 5.在普通雙蒸水中可以保留一年以上,不退色,縮小,蛋白質不擴散,一年后依然可以用來做Western blot等蛋白微分析。 操作步驟: 1. 染色 1) 電泳后用清水沖洗膠30-60 秒鐘,然后將PAGE 膠放置于一個透明的玻璃培養皿中,根據膠大小倒入適量的染色液(確保膠都浸沒在染色液內,20-25ml 足夠染色一塊普通的8×10cm mini 膠了),搖床上輕搖染色10-15 分鐘(10-15%膠15 分鐘,5-7.5%膠可縮短時間到10 分鐘)。 2) 倒棄染色液,加入20-25ml 的顯色液,立刻同時用手輕搖膠顯色0.5-1 分鐘(將透明培養皿放在一個黑色(暗)背景上觀察條帶出現情況,此時在不透明的白背景上應該看到透明的蛋白條帶,不要顯色時間過長,過長反而會降低分辨率)。 3) 看到滿意條帶后,用清水沖洗1-2 分鐘后,放置于蒸餾水中保存。 2. 脫色 1) 根據個人需要將所需目的條帶切下后或者直接整塊膠加入適量脫色液,搖床上輕搖10 分鐘或者直到脫色*,后用清水沖洗幾次。 2) 現在膠可以用于蛋白電洗脫,Western blot 等操作,或者可以再用傳統方法染色。 儲存條件:室溫避光,有效期12個月。 本制品別名:可逆微量蛋白染色試劑盒|敏感可脫色PAGE膠蛋白染色試劑盒 |
使用方法:本產品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內,擰緊蓋,在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達,則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
人轉鐵蛋白標準溶液
人血液免疫球蛋白G(IgG)免疫比濁法定量檢測試劑盒
G標準溶液
人血液免疫球蛋白M(IgM)免疫比濁法定量檢測試劑盒
M標準溶液
小鼠圍脂滴蛋白4(PLIN4)elisa ,英文名: PLIN4 ELISA Kit
兔內皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測試劑盒RabbitEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T
牛胎盤生長因子(PGF)免疫試劑盒 Bovine Placea growth factor,PGF ELISA kit
英文名稱HumanAmphiregulinELISAKit人角化細胞內分泌因子(AR)規格:96T/48T
調料比色法定量檢測試劑盒20次
RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKelisa大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白(AMPK)elisa規格:96T/48T
PAGE膠微量蛋白染色試劑盒(可脫色)小鼠肌鈣蛋白I(cTnI)elisa檢測試劑盒
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)elisa檢測試劑盒
小鼠肌鈣蛋白Ⅰ(cTnⅠ)elisa檢測試劑盒
小鼠肌動蛋白相關蛋白2/3復合體亞基4(ARPC4)elisa檢測試劑盒
小鼠饑餓素(GHRL)elisa檢測試劑盒
操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。