磁珠法病毒DNA/RNA提取試劑盒
【目錄號】:D001(100 preps)
【保存條件】
室溫保存(15-30℃),有效期為12個月。
【試劑盒組成】
試劑名稱 | 規格 | |
1 | 裂解液 | 20ml |
2 | 蛋白酶混合液 | 2ml |
3 | 磁珠 | 200ul |
4 | 洗液一 | 60ml |
5 | 洗液二 | 60ml |
6 | 洗脫液 | 6ml |
【預期用途】
本試劑盒適用于人全血、血漿/血清、口腔拭子、唾液等樣品中快速提取、純化病毒DNA/RNA的試劑盒,樣品經簡單預處理后直接提取,提取產物純度高,片段完整,以供后續的分子檢測的應用。
【自備儀器和試劑】
1) 恒溫水浴鍋,Votex
2) 80%乙醇,異丙醇
【操作步驟】
核酸提取純化準備:裂解液如有沉淀,請于56℃溫浴至沉淀*溶解后使用。
1. 取待檢唾液樣本200μl,依次加入20μl蛋白酶混合液、200μl裂解液,漩渦振蕩10s,56°C孵育10分鐘。
2. 然后加入300μl異丙醇和2μl磁珠,上下顛倒離心管10次,使管內磁珠分布均勻。
3. 靜置離心管10分鐘,每隔兩分鐘上下顛倒離心管5次,使管內磁珠分布均勻。
4. 將離心管置于離心機上,8000g離心1min,用移液器吸去管內液體。
5. 加入600μl洗液一,用移液器槍頭輕柔打散管壁磁珠,漩渦振蕩10s,直至其分布均勻。
6. 將離心管置于離心機上,8000g離心1min。用移液器吸去管內液體。
7. 加入600μl洗液二,用移液器槍頭輕柔打散管壁磁珠,漩渦振蕩10s,直至其分布均勻。
8. 將離心管置于離心機上,8000g離心1min。用移液器吸去管內液體。
9. 加入600μl的80%乙醇,用移液器槍頭輕柔打散管壁磁珠,漩渦振蕩10s,直至其分布均勻。
10. 將離心管至于離心機上,8000g離心1min。用移液器吸去管內液體。
11. 將離心管至于離心機上,8000g離心30s。用移液器吸去管內殘余液體。
12. 打開管蓋,室溫干燥2分鐘。
13. 加入60μl洗脫液,用移液器槍頭打散管壁磁珠,直至其分布均勻。56°C孵育3分鐘。
14. 將離心管至于離心機上,10000g離心1min。吸取上清至一個無核酶干凈的離心管中,此即為純化后的核酸溶液。
【注意事項】
1.所有吸棄上清的操作都不能將磁珠吸出。
2.每次洗滌都需要移液器槍頭輕柔打散管壁磁珠,漩渦振蕩10s,直至其分布均勻。
3.裂解液必須*溶解為均一液體,如果出現渾濁或者沉淀,請將其置于37-56℃孵育直至澄清。
4.本試劑盒涉及的檢測樣本應視為具有傳染性物質,操作和處理均需符合衛生部《微生物生物醫學實驗室生物安全通用準則》和《醫療廢物管理條例》相關要求。