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口蹄疫病毒Asia 1血清型PCR檢測(cè)試劑盒

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  • 公司名稱上海莼試生物技術(shù)有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號(hào)50T
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間2021/7/12 15:01:33
  • 訪問(wèn)次數(shù)346
產(chǎn)品標(biāo)簽:

口蹄疫病毒AsiaPCR檢測(cè)試劑盒50T

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    上海莼試生物技術(shù)有限公司Shanghai C-reagent Biotechnology  Co. Ltd.  專業(yè)服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,擁有分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、化學(xué)等方面的科研技術(shù)團(tuán)隊(duì),經(jīng)營(yíng)科研生化試劑、分析試劑、實(shí)驗(yàn)耗材,推出技術(shù)先進(jìn)、質(zhì)量穩(wěn)定的科研產(chǎn)品。為全國(guó)乃至于世界各地科研機(jī)構(gòu)、工業(yè)、電子、醫(yī)療、科技等領(lǐng)域的客戶,提供系統(tǒng)的產(chǎn)品資源及配套技術(shù)服務(wù)。推出十幾個(gè)種類產(chǎn)品線,部分產(chǎn)品接受定制服務(wù)!



      公司著力立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,全力打造品質(zhì)生物科技產(chǎn)品鏈和技術(shù)服務(wù)鏈!




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口蹄疫病毒Asia 1血清型PCR檢測(cè)試劑盒公司相關(guān)產(chǎn)品:
熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR解整合素樣金屬蛋白酶33試劑盒川芎;Tetramethylpyraz
裂孔平伏菌Poria│versipora (Pers.) Romell 質(zhì)量規(guī)格:>99%解整合素樣金屬蛋白酶19試劑盒茶多酚;Tea polyphenol
釀酒酵母Saccharomy
口蹄疫病毒Asia 1血清型PCR檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品信息

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:口蹄疫病毒Asia 1血清型PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):CP99590
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
?
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
玳瑁(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ketanserin胰島抗原12/核轉(zhuǎn)錄因子SOX13抗體規(guī)格:1g

丹參(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: DL-Octopamine HCl有絲分裂相關(guān)蛋白INSC抗體規(guī)格:5g

丹參素(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Sulindac磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體規(guī)格:5g

丹參素鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: SulindacRAN結(jié)合蛋白7抗體規(guī)格:25g

丹參酮IIA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tropic acid兔抗人γ-鏈規(guī)格:5g

丹參酮IIA-磺酸鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Ketoglutaric acid免疫球蛋白超家族成員B抗體規(guī)格:1g

丹參酮I(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 2-Ketoglutaric acid六磷酸肌激酶3抗體規(guī)格:25g

丹酚酸A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cabozantinib(BMS907351)干擾素kappa蛋白抗體規(guī)格:5g

丹酚酸B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: H-D-SER-OET HCL白介素1α/IL-1α抗體規(guī)格:1g

丹酚酸B二酯英文名稱: Asenapine Maleate白介素1α/IL-1α抗體規(guī)格:5g

丹酚酸C(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Trityl candesartan cilexetil磷酸化白介素2受體β鏈抗體規(guī)格:100g

丹酚酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Tamoxifen胰島素樣蛋白3抗體規(guī)格:25g

丹酚酸F英文名稱: Cefotiam hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體規(guī)格:5g

丹皮酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cefotiam hydrochloride18抗體規(guī)格:25g

丹皮酚新苷英文名稱: (2E,4S)-4-Hydroxy-3,7-dimethyl-2,6-octadien-1-yl beta-D-glucopyranosideα重鏈H4抗體規(guī)格:5g
口蹄疫病毒Asia 1血清型PCR檢測(cè)試劑盒ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

小鼠肉瘤瘤株;S180

人膠質(zhì)(少突)(HO) (1×106 )

人巨白血病株;Mo7e 大鼠卵巢上皮*培養(yǎng)基 100mL

H22 小鼠肝癌

原代表皮角化特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝:1ml

phospho-Ephrin B (Tyr324/329)  磷酸化Ephrin B抗體規(guī)格: 0.1ml

EphA2/Eph receptor A2  內(nèi)皮受體蛋白激酶抗體規(guī)格: 0.1ml

Phospho-EphA2 (Tyr594)  磷酸化蛋白激酶A2受體抗體規(guī)格: 0.1ml

EphA4 R  蛋白激酶A4受體抗體規(guī)格: 0.2ml

EphB2 R  EphB2 R抗體規(guī)格: 0.1ml
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號(hào)管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從6號(hào)管中取5 μL溶液到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從5號(hào)管中取5 μL溶液到4號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從1-6號(hào)管中分別取5 μL和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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