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塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒

參考價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱上海莼試生物技術(shù)有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       號50T
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間2021/7/12 15:01:54
  • 訪問次數(shù)408
產(chǎn)品標(biāo)簽:

塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒50T

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大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR解整合素樣金屬蛋白酶12試劑盒 ;Theophylline
假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>97%解整合素樣金屬蛋白酶10試劑盒五加葉中;Hederasaponin
: ivcas7.01082資源名稱: 蘇云金芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%解脲脲原
塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒 產(chǎn)品信息

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參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號:CP99591
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)鑒定——PCR反應(yīng)條件:

循環(huán)步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)數(shù)

預(yù)變性

94℃

5   min

1

變性

94℃

10   sec

30-40

退火

50-65℃

20   sec

30-40

延伸

72℃

30   sec/kb

30-40

終延伸

72℃

5   min

1

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
      10×PCR buffer             5μl
      dNTP mixl                 4μl
      引物1(10pM)               2μl
      引物2(10PM)              2μl
      Taq酶(2U/μl)            1μl
      DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
     加ddH2O至               50 μl
     視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
使用方法:
一、樣品DNA的制備
用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC管中不加任何陽性對照。
8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個(gè)樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
丹皮酚原苷;牡丹酚原甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Wilforlide A免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體規(guī)格:25g

丹葉大黃素英文名稱: Forsythoside E胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞基ALS抗體規(guī)格:5g

丹葉大黃素-3'-O-葡萄糖苷英文名稱: Rotundine/ L-Tetrahydropalmatine豬胰島素單克隆抗體規(guī)格:1g

丹芝B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: EGCG, (-)-Epigallocatechin gallate/Green Tea ExtractKB抑制蛋白激酶α/IκBα/IKK-α/IKKα/I-κB-α 抗體規(guī)格:5g

單白前苷B英文名稱: Deoxycholic acid抗抗體規(guī)格:5g

膽固(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcein-AM 磷酸化肌聚磷酸鹽磷酸酶樣蛋白1抗體規(guī)格:25g

(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Nicotinamide胰島素受體抗體規(guī)格:5g

膽木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: cucurbitacins胰島素受體α抗體規(guī)格:1g

膽酸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-Hydroxytryptophan(5-HTP)胰島素受體β抗體規(guī)格:5g

淡豆豉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: 5-HydroxytryptophanKB抑制蛋白激酶α/β抗體規(guī)格:10mg

蛋黃磷脂酰英文名稱: Imazapyr acid白介素12抗體規(guī)格:250mg

當(dāng)歸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Imazapyr acid干擾素誘導(dǎo)35蛋白抗體規(guī)格:100ml

當(dāng)歸尾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lithocholic Acid完整膜蛋白E25A抗體規(guī)格:1g

當(dāng)歸酰基戈米辛H(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Potassium Oxonate小腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體規(guī)格:5g

當(dāng)歸酰基戈米辛O英文名稱: Potassium Oxonate胰島素降解酶抗體規(guī)格:1g
塞內(nèi)卡病毒PCR檢測試劑盒BNL CL.2(小鼠胚胎肝) 5×106cells/瓶×2 CM-M046小鼠腸上皮*培養(yǎng)基100mL 人多發(fā)性骨髓瘤;RPMI-8226 [RPMI8826]

獼猴皮膚;MMS4

CDH5 Others Rat 大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 人裂解液 (陽性對照)

THP-1,人單核白血病 BALB/C小鼠肝上皮,BNL1ME A.7R.1 角質(zhì)生長添加物(不含動物成分)KGS-acf

NCI-H209(人小肺癌) 5×106cells/瓶×2

嬰兒真皮成纖維Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

CK20  角蛋白20抗體規(guī)格: 0.2ml

CK1/8/19  角蛋白1/8/19抗體規(guī)格: 0.1ml

CK2  角蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml

CK3  角蛋白3抗體規(guī)格: 0.1ml

CK4  角蛋白4抗體規(guī)格: 0.1ml

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