ELISA技術原理:
以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來。
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
2. 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
3. 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應,再加入酶標記 的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量 與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定 性或定量分析,測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復性好。
商品屬性:
英文名稱 | HD ELISA Kit | 規格 | 48T/96T |
貨號 | CS-5178E | 類別 | 大鼠elisa試劑盒 |
包 裝 | 盒裝液體 | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
實驗規則:
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%,可用水和電子天平進行確定,但有專業人員進行矯正。
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支,吸取不同的液體后,要更換槍頭,即使是吸取標準品時。
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩定。
4、實驗時,要使底物避光保存。
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體,也可以用酶標儀的晃動功能。
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。
10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*,沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
操作注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
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