細胞名稱 小鼠血細胞;WEHI-3 [WEHI3]
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長;部分細胞貼壁生長
特征特性 該細胞表達補體C3受體(C3R),產(chǎn)生、粒細胞集落刺激活性(CSA)、IL-3。4 ng/ml LPS可以抑制WEHI-3的生長,更高濃度可以阻斷其生長;30~40 μg/ml右旋葡聚糖也可抑制其生長;可以吞噬乳膠顆粒,但無毒性;可吞噬酵母聚糖和BCG,并阻斷該細胞的生長;該細胞僅表現(xiàn)出微弱的抗體依賴的細胞介導(dǎo)的細胞毒反應(yīng)。鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 細胞密度維持在2×105~ 2×106/ml,每2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 70~78
使用權(quán)限 A類小鼠血細胞;WEHI-3 [WEHI3]
實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人己糖激酶3(HK3)elisa試劑盒 human hexokinase 3, HK3 Elisa Kit 96T/48T
人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)elisa試劑盒 human phosphofructokinase-plaet, PFKP Elisa Kit 96T/48T
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)elisa試劑盒 human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase Elisa Kit 96T/48T
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)elisa試劑盒 human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase Elisa Kit 96T/48T
人凋亡相關(guān)半肽酶4(Casp4)elisa試劑盒 human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase, Casp4 Elisa Kit 96T/48T
人吡哆醛/吡哆醇6激酶(PDXK)elisa試劑盒 human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase, Casp4 Elisa Kit 96T/48T
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)elisa試劑盒 human dihydropyrimidinase-like 2, DPYSL2 Elisa Kit 96T/48T
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)elisa試劑盒 human serum/glucocorticoid regulated kinase 2, GSK2 ISA KIT 96T/48T
人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)elisa試劑盒 human mitogen activated protein kinase kinase 6, MKK6 Elisa Kit 96T/48T
人吡哆醛/吡哆醇6磷酸酶(PDXP)elisa試劑盒 human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase, PDXP Elisa Kit 96T/48T
人T細胞特異性鳥苷三磷酸酶(Tgtp)elisa試劑盒 Human T-cell specific GTPase, Tgtp Elisa Kit 96T/48T
人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)elisa試劑盒 Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1, FDFT1 Elisa Kit 96T/48T
人D-乳酸脫氫酶(D-LDH) elisa試劑盒 Human D-Lactate Dehydrogenase, D-LDH Elisa Kit 96T/48T
人α1抗(α1-AT)elisa試劑盒 Human α1-Antitrypsin, α1-AT Elisa Kit 96T/48T
人1(KLK 1)elisa試劑盒 Human Kallikrein 1, KLK 1 Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化乙酰(PaCoA)elisa試劑盒 Human Phosphorylated acetyl CoA, PaCoA Elisa Kit 96T/48T
人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)elisa試劑盒 Human phosphoglycerate mutase 2, PGAM2 Elisa Kit 96T/48T
人前列腺素D合成酶(PTGDS)elisa試劑盒 Human Prostaglandin D synthase, PTGDS Elisa Kit 96T/48T
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)elisa試劑盒 Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1, PPIL1 Elisa Kit 96T/48T
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)elisa試劑盒 Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1, PPIL1 Elisa Kit 96T/48T
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)elisa試劑盒 Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3, MAPKAPK3 Elisa Kit 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)elisa試劑盒 Human Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme, ACEⅠ Elisa Kit 96T/48T
人(AP)elisa試劑盒 Human Aprotinin, AP Elisa Kit 96T/48T
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa試劑盒 Human Caspase 12, Casp-12 Elisa Kit 96T/48T
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa試劑盒 Human Caspase 12, Casp-12 Elisa Kit 96T/48T
人蛋白激酶A(PKA)elisa試劑盒 Human Protein kinase A, PKA Elisa Kit 96T/48T
人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)elisa試劑盒 Human A Disintegrin And Metalloprotease 10, ADAM10 Elisa Kit 96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)elisa試劑盒 Human matrix metalloproteinase 11, MMP11 Elisa Kit 96T/48T
人胸苷酸合成酶(TS)elisa試劑盒 Human thymidylate synthetase, TS Elisa Kit 96T/48T
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)elisa試劑盒 Human thymidinephosphorylase, TP Elisa Kit 96T/48T