細胞名稱 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雄性河川型水牛的耳部皮膚組織,2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
SRI cDNA Rat 大鼠 SRI 基因全長ORF克隆
SFR1 cDNA Rat 大鼠 SFR1 基因全長ORF克隆
NAPA cDNA Rat 大鼠 NAPA 基因全長ORF克隆
GNPDA1 cDNA Rat 大鼠 GNPDA1 基因全長ORF克隆
GTPBP5 cDNA Rat 大鼠 GTPBP5 基因全長ORF克隆
PPT2 cDNA Rat 大鼠 PPT2 基因全長ORF克隆
PLBD1 cDNA Rat 大鼠 PLBD1 基因全長ORF克隆
G6PC cDNA Rat 大鼠 G6PC 基因全長ORF克隆
SURF4 cDNA Rat 大鼠 SURF4 基因全長ORF克隆
SUOX cDNA Rat 大鼠 SUOX 基因全長ORF克隆
PPARG cDNA Rat 大鼠 PPARG 基因全長ORF克隆
LOC100361907 cDNA Rat 大鼠 LOC100361907 基因全長ORF克隆
ARF1 cDNA Rat 大鼠 ARF1 基因全長ORF克隆
DPAGT1 cDNA Rat 大鼠 DPAGT1 基因全長ORF克隆
TRIQK cDNA Rat 大鼠 TRIQK 基因全長ORF克隆
FAM3A cDNA Rat 大鼠 FAM3A 基因全長ORF克隆
STX7 cDNA Rat 大鼠 STX7 基因全長ORF克隆
CPB2 cDNA Rat 大鼠 CPB2 基因全長ORF克隆
ARPC2 cDNA Rat 大鼠 ARPC2 基因全長ORF克隆
HNRNPA2B1 cDNA Rat 大鼠 HNRNPA2B1 基因全長ORF克隆
VHL cDNA Rat 大鼠 VHL 基因全長ORF克隆
SYNA cDNA Rat 大鼠 SYNA 基因全長ORF克隆
KRT5 cDNA Rat 大鼠 KRT5 基因全長ORF克隆
PSMD2 cDNA Rat 大鼠 PSMD2 基因全長ORF克隆
TEX261 cDNA Rat 大鼠 TEX261 基因全長ORF克隆
SDHA cDNA Rat 大鼠 SDHA 基因全長ORF克隆
RGD1359108 cDNA Rat 大鼠 RGD1359108 基因全長ORF克隆
ISLR cDNA Rat 大鼠 ISLR 基因全長ORF克隆
GSTZ1 cDNA Rat 大鼠 GSTZ1 基因全長ORF克隆
FTO cDNA Rat 大鼠 FTO 基因全長ORF克隆
ZFP330 cDNA Rat 大鼠 ZFP330 基因全長ORF克隆
LAPTM5 cDNA Rat 大鼠 LAPTM5 基因全長ORF克隆
FKBP10 cDNA Rat 大鼠 FKBP10 基因全長ORF克隆
DCAF11 cDNA Rat 大鼠 DCAF11 基因全長ORF克隆
PLA2G15 cDNA Rat 大鼠 PLA2G15 基因全長ORF克隆
CPT1B cDNA Rat 大鼠 CPT1B 基因全長ORF克隆
SERF2 cDNA Rat 大鼠 SERF2 基因全長ORF克隆
ADCK3 cDNA Rat 大鼠 ADCK3 基因全長ORF克隆
CPA1 cDNA Rat 大鼠 CPA1 基因全長ORF克隆
IFIT1 cDNA Rat 大鼠 IFIT1 基因全長ORF克隆
PRPF4 cDNA Rat 大鼠 PRPF4 基因全長ORF克隆
TMX1 cDNA Rat 大鼠 TMX1 基因全長ORF克隆
CDK10 cDNA Rat 大鼠 CDK10 基因全長ORF克隆
ARL6IP5 cDNA Rat 大鼠 ARL6IP5 基因全長ORF克隆
SKP1 cDNA Rat 大鼠 SKP1 基因全長ORF克隆
ARFGAP2 cDNA Rat 大鼠 ARFGAP2 基因全長ORF克隆
AIFM2 cDNA Rat 大鼠 AIFM2 基因全長ORF克隆
LOC100362548 cDNA Rat 大鼠 LOC100362548 基因全長ORF克隆
GOLPH3L cDNA Rat 大鼠 GOLPH3L 基因全長ORF克隆