背景介紹：Zeta-globin is an alpha-like hemoglobin. The zeta-globin polypeptide is synthesized in the yolk sac of the early embryo, while alpha-globin is produced throughout fetal and adult life. The zeta-globin gene is a member of the human alpha-globin gene cluster that includes five functional genes and two pseudogenes. The order of genes is: 5' - zeta - pseudozeta - mu - pseudoalpha-1 - alpha-2 -alpha-1 - theta1 - 3'.
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中文名稱：血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體
英文名稱：Anti-HBZ antibody
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體-胞內抗體直接標記
1、將消化下來的細胞用1 X PBS洗兩遍，然后用0.5 mL 0.5%BSA的 1 X PBS重懸。
2、加入等量37℃預熱的4%多聚甲醛固定細胞，37℃孵育10分鐘。
3、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍并用1ml 90%的冰甲醇重懸細胞，放置冰上30分鐘。
4、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。
5、3%BSA封閉。
6、樣本標記：100μl 0.5%BSA的 1 X PBS內細胞量為0.5-1X106個。
a)不標記細胞樣本
b)同型對照
c)一抗
7、以抗體說明書上的比例加入抗體，冰上孵育30分鐘。
8、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。
9、加入500μl 1 X PBS上機檢測。
D、胞內抗體間接標記
1、將消化下來的細胞用1 X PBS洗兩遍，然后用0.5 mL 0.5%BSA的 1 X PBS重懸。
2、加入等量預熱的4%多聚甲醛固定細胞，37℃孵育10分鐘。
3、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍并用1ml 90%的冰甲醇重懸細胞，放置冰上30分鐘。
4、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。
5、樣本標記：100μl 0.5%BSA的 1 X PBS內細胞量為5X105-1X106個。
a)不標記細胞樣本
b)單獨二抗
c)同型對照+二抗
d)一抗+二抗
6、以抗體說明書上的比例加入抗體，冰上孵育30分鐘。
7、用0.5%BSA的 1 X PBS洗兩遍。
8、0.5%BSA的 1 X PBS重懸細胞后加入等體積10%山羊血清，室溫孵育15分鐘。
9、加入熒光標記二抗，放置冰上，避光條件下孵育30分鐘。
10、用0.5%BSA的1 X PBS洗兩遍。
11、加入500μl 1 X PBS上機檢測。
規格：0.1ml/0.2m
濃度：1mg/1ml
抗體來源：本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型：兔來源為多抗，鼠來源為單抗
產品類型：一抗
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體簡單介紹：
別 名：HBAZ; HBAZ_HUMAN; HBZ 2; HBZ; HBZ2; Hemoglobin subunit zeta; Hemoglobin zeta; Hemoglobin zeta chain; Zeta globin; Zeta-globin.
此產品本公司有標記的一抗出售，相關標記有：Alexa Fluor 350 標記、Alexa Fluor 488 標記、Alexa Fluor 555 標記、Alexa Fluor 647 標記、AP標記、APC標記、Biotin標記、Cy3標記、Cy5標記、Cy5.5標記、Cy7標記、FITC標記、Gold標記、HRP標記、PE標記、PE-Cy3標記、PE-CY5標記、PE-CY5.5標記、PE-CY7標記、RBITC標記
直接免疫熒光標記法 本方法操作簡便，結果準確，易于分析，適用于同一細胞群多參數同時測定。雖然直標抗體試劑成本較高，但減少了間接標記法中較強的非特異熒光的干擾，因此更適用于臨床標本的檢測。
間接免疫熒光標記法 本方法費用較低，二抗應用廣泛，多用于科研標本的檢測。但由于二抗一般為多克隆抗體，特異性較差，非特異性熒光背景較強，易影響實驗結果。所以標本制備時應加入陰性或陽性對照。另外，由于間標法步驟較多，增加了細胞的丟失，不適用測定細胞數較少的標本。
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體流式抗體選擇標準
1. 滿足抗體選擇的基本條件
靶蛋白特異性：確定目的細胞的特異性表面標記或者胞內標記，知道您要檢測什么。
種屬：嚴格按照待測樣本種屬選擇抗體來源，流式抗體基本無法進行種屬間交叉反應。
應用領域：可用于流式實驗，說明書中明確標注經FC實驗測試，有實驗數據圖和用量說明。
抗體克隆號：一般選擇參考文獻上提到的克隆；同一抗體多個克隆號的情況下，可以選擇熒光標記種類zui多的那個克隆。
2. 確定流式細胞儀的參數配置
在設計流式方案前，先確定需要使用流式細胞儀檢測的型號，對該儀器的參數配置要了解以下幾個方面信息：
激光器：常見的流式細胞儀有488nm和635nm/633nm兩個激光器，但有些機器在購買時因某些原因，只裝了一個488nm激光器，所以需要注意型號相同的機器也未必激光配置相同。
濾光片：也就是有幾個檢測通道，這決定了你zui多可以同時檢測幾個指標。
儀器的具體型號：有助于再次確定檢測通道。因為同一個熒光在不同的流式細胞儀上檢測，有時候檢測通道也是不一樣的。
3. 熒光的選擇
選擇直標還是間標：待測抗原表達高的盡量選擇直標抗體，待測抗原表達豐度低的要考慮選間標*標記標抗體。
熒光強弱：熒光本身有強弱之分，可視抗原表達強弱及分群情況選擇合適的熒光。如抗原表達弱或分群不明顯的建議選擇強熒光例如：PE、APC；反之，抗原表達強或分群明顯的建議選擇zui常用的弱熒光例如FITC即可（常用熒光強弱排序程度為：PE>APC>PE-cy5/Cy5>PerCP/PerCP-Cy5.5/Cy5.5>FITC。
4. 多色熒光搭配的原則
多色分析方案中熒光抗體的選擇和搭配，會受到很多因素的制約：
檢測通道不能沖突：每個檢測通道只能選擇1種熒光素，各通道之間的熒光素可以隨意搭配（如FL1選擇了FITC標記的抗體，就不能再選擇Alexa Fluor488標記的抗體；而同組實驗的其余抗體選擇PE或者APC標記，都是可以隨意組合的）；
熒光強弱：所選各種熒光素光譜的重疊應當盡量減少，否則將會導致較大的補償。zui常用的4色熒光搭配是：FITC、PE、PerCP/PerCP-Cy5.5、APC；
5. 同型對照抗體的選擇
同型對照（Isotype Control），用于消除由于抗體非特異性結合到細胞表面而產生的背景染色，是真正意義上的流式陰性對照，流式細胞實驗*的一項。同型對照是使用與一抗相同種屬來源、相同亞型及亞鏈、相同熒光標記的免疫球蛋白，也要求使用相同劑量。
純化級別抗體：如果是純化的一抗加熒光標記的二抗，那么應該選擇與一抗相對應的同型對照抗體（如樣品管為：純化的CD3+PE標記的二抗+樣本；則對照管為：純化的同型對照+ PE標記的二抗+樣本）。
血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ抗體，Anti-HBZ抗體保存條件：Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復凍融，保質期一年。
免疫熒光雙重染色熒光雙染或多重染色是指將帶有不同熒光素標記的抗體孵育在同一張切片上，鏡下觀察時將不同的顏色組合在一起，將不同的抗原表達情況一起呈現出來，這樣分析多個抗原的關聯性更客觀、更直接。
熒光雙染也有直接法和間接法。直接法是使用帶有不同熒光素標記的兩個抗體同時孵育后觀測；間接法需要用到兩個不同種屬來源的一抗（例如一個鼠源抗體，一個兔源抗體），后面要選擇與一抗相對應的二抗同時需要帶有不同的熒光素標記（例如FITC標記山羊抗小鼠和Cy3標記山羊抗兔），間接法需要同時兼顧一抗和二抗的種屬關系，避免出現相互的交叉反應。
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