背景介紹:The Brn family of transcription factors are found in a highly restricted subset of neurons and are critical to the early embryonic development of the central nervous system. Brn-1 and Brn-2 are class III POU (Pit-Oct-Unc) domain proteins, whereas Brn-3 is a class IV POU domain protein. Three Brn-3 proteins have been described and are designated Brn-3a, Brn-3b and Brn-3c. While Brn-3a and Brn-3c stimulate transcription, Brn-3b generally functions as a transcriptional repressor. However, Brn-3b, but not Brn-3a, has been shown to regulate the expression of the acetylcholine receptor. Interestingly, Brn-3a has two functional transactivating domains, one at the amino-terminus and one at the carboxy-terminus. Brn-2 is thought to be involved in smooth muscle cell development and differentiation.
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腦特定蛋白Brn3B抗體,Anti-BRN3B抗體-上海研盟生物有限公司優質*產品。我公司銷售國內外科研產品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標記抗體,Elisa酶聯免疫試劑盒,放免試劑盒,培養基,各種動物血清等產品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購。
中文名稱:腦特定蛋白Brn3B抗體
英文名稱:Anti-BRN3B antibody
規格:0.1ml/0.2m
濃度:1mg/1ml
抗體來源:本公司抗體有兔來源和鼠來源等
克隆類型:兔來源為多抗,鼠來源為單抗
產品類型:一抗
腦特定蛋白Brn3B抗體,Anti-BRN3B抗體簡單介紹:
別 名:BRN3B; class 4; transcription factor 2; Brain specific homeobox/POU domain protein 3B; Brain-3B; Brain-specific homeobox/POU domain protein 3B; Brn-3B; BRN3.2; Brn3b POU domain transcription factor; PO4F2_HUMAN; POU class 4 homeobox 2; POU domain; POU domain class 4 transcription factor 2; POU domain protein; POU4F2.
此產品本公司有標記的一抗出售,相關標記有:Alexa Fluor 350 標記、Alexa Fluor 488 標記、Alexa Fluor 555 標記、Alexa Fluor 647 標記、AP標記、APC標記、Biotin標記、Cy3標記、Cy5標記、Cy5.5標記、Cy7標記、FITC標記、Gold標記、HRP標記、PE標記、PE-Cy3標記、PE-CY5標記、PE-CY5.5標記、PE-CY7標記、RBITC標記
石蠟切片免疫組化染色步驟
三步法(以SP試劑盒為例)
- 石蠟切片脫蠟至水
- 蒸餾水沖洗,PBS浸泡5分鐘,如果采用抗原修復,可在此步后進行
- 3% H2O2 室溫孵育5~10分鐘,以消除內源性過氧化物酶的活性,PBS沖洗,2分鐘×3次
- 5~10%正常山羊血清封閉,室溫孵育10分鐘。傾去血清,勿洗,滴加適當比例稀釋的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小時或4℃過夜
- PBS沖洗,2分鐘×3次
- 滴加適當比例稀釋的*標記二抗(1%BSA-PBS稀釋),37℃孵育10~30分鐘;或滴加第二代*標記二抗工作液,37℃或室溫孵育10~20分鐘
- PBS沖洗,2分鐘×3次
- 滴加適當比例稀釋的辣根酶標記鏈霉卵白素(PBS稀釋),37℃孵育10~30分鐘;或第二代辣根酶標記鏈霉卵白素工作液,37℃或室溫孵育10~20分鐘
- PBS沖洗,2分鐘×3次
- 顯色劑顯色(DAB或AEC)
- 自來水充分沖洗,復染,脫水透明、封片
- 如果必要,可選用avdin封閉內源性*
腦特定蛋白Brn3B抗體保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
避免反復凍融,保質期一年。
免疫組化問題解答
1、染色弱?
原因:抗體濃度過低、孵育時間過短
解決方法:提高抗體濃度、孵育時間不能少于60分鐘
原因:試劑超過有效使用時間
解決方法:應更換試劑
原因:操作中添加試劑時緩沖液未瀝干
解決方法:每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液 使試劑稀釋 (應防止切片干燥)
原因:室溫太低,低于15度
解決方法:要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4度冰箱過夜
原因:蛋白封閉過度
解決方法:封閉不要超過12分鐘
染色陰性?
原因:操作步驟錯誤
解決方法:應重試,設陽性對照
原因:組織中無抗原
解決方法:設陽性對照以驗證試驗結果
原因:一抗與二抗種屬連接錯誤
解決方法:仔細確定一抗二抗種屬無誤
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