上海研盟生物有限公司*品質供應Anti-EPR1抗體,我公司銷售國內外科研產品,如生物試劑、生化試劑,一抗二抗,各種標記抗體,Elisa酶聯免疫試劑盒,放免試劑盒,培養基,各種動物血清等產品,歡迎廣大新老客戶前來咨詢訂購,訂購:或。
效應細胞蛋白酶受體1抗體,Anti-EPR1抗體簡單介紹:
【中文名稱】:效應細胞蛋白酶受體1抗體
【英文名稱】:Anti-EPR1抗體
【別 名】:Effector cell peptidase receptor 1; Effector cell protease receptor 1; EPR 1; EPR1; EPR-1; EPCR_HUMAN.
【規 格】:0.1ml/0.2ml
【相關標記】:Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 647、AP、APC、Biotin、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7、FITC、Gold、HRP、PE、PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5、PE-CY7、RBITC.
【濃 度】:1mg/1ml
【抗體來源】:Rabbit or Mouse or Goat
【克隆類型】:polyclonal or monoclonal
【產品類型】:一抗
【產品應用】:可以用于做石蠟切片免疫組化,冰凍切片免疫組化,Elisa,WB,免疫熒光、流式細胞術等實驗。
效應細胞蛋白酶受體1抗體背景介紹:Cellular receptors for blood proteases regulate chemotaxis, extracellular proteolysis, and growth behavior of normal and malignant cells. Effector cell protease receptor-1 (EPR1) is a receptor for the coagulation protease factor Xa. EPR1 is characterized by a cysteine-rich extracellular module, a single membrane-spanning domain, and a serine-rich cytoplasmic tail featuring at least 15 potential phosphorylation sites. EPR1 also contains 2 N-linked glycosylation sites, 4 O-linked glycosylation sites, and a chondroitin sulfate attachment site, which may provide anchoring for carbohydrate chains, EPR1 transfectants bind to factor Xa in a specific and saturable manner, and in the absence of factor V/Va promote prothrombin activation in a factor Xa concentration-dependent reaction. Activated plaets and megakaryocytes express EPR1. Both EPR1 and membrane-bound factor Va are thought to be required to mediate factor Xa binding to the activated plaet to form a functional prothrombinase complex.
Western Blotting 實驗步驟概述:
1、 組織取材:組織塊稱重
2、 利用液氮、研缽粉碎組織塊
3、 加入RIPA緩沖液(每克組織3ml RIPA),PMSF(每克組織30μl,10 mg/ml PMSF),
利用Polytron進一步勻漿(15,000轉/分*1分鐘)維持4℃
4、 加入PMSF(每克組織30μl,10 mg/ml PMSF),冰上孵育30分鐘
5、 移入離心管4℃,約20,000g(約15,000轉)15分鐘
6、 上清液為細胞裂解液可分裝-20℃保存
7、 進行Bradford比色法測定蛋白質濃度
8、 取相同質量的細胞裂解液(體積*蛋白質濃度),并加等體積的2×電泳加樣緩沖液
9、 沸水浴中3分鐘
10、上樣
11、電泳(濃縮膠20mA,分離膠35mA)
12、電轉膜儀轉膜(100mA 40分鐘)
13、膜用麗春紅染色,膠用考馬斯亮藍染色
14、Westernblot 試劑盒顯色
15、分析比較記錄
效應細胞蛋白酶受體1抗體,Anti-EPR1抗體多肽的溶解與保存:
一、凍干多肽的溶解
1、多肽溶解的主要問題是二級結構的形成。雖然疏水肽鏈二級結構的形成更明顯,但除zui短的肽鏈外,此現象產生在幾乎所有肽鏈,與極性無關。所以,溶解多肽的*個原則是使用無菌蒸餾水或去離子水,當然無氧水。多肽溶液可能遇到細菌降解,為防止此情況的發生,應溶解在無菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過濾除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化,應溶于無氧的水中,無氧水可通過注入惰性氣體(氮、氦、氬)減壓除氣得到;
2、若多肽不溶于純水,超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。注意:超聲處理會引起溶液發熱或多肽降解;
3、若多肽含有多個堿性氨基酸,使用(1-10%)的乙酸水溶液:對于疏水性強的多肽,應使用50%的乙酸;
4、若多肽中含有大量酸性氨基酸,可用氨溶液(1-10%)或乙酸乙基*或重碳酸鹽等揮發性的堿性緩沖液溶解。pH值在層析前必須調整;
5、異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱,有機溶劑的量必須很少否則將嚴重影響停留時間;
6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香鏈而高度疏水、或為中性肽時,DMF或DMSO等膜變性劑的使用,有利于多肽的溶解:
a.高濃度模變性劑通過破壞多肽的二級結構而助溶;
b.膜變性劑適于多肽分析液的制備,但可能會對其生物活性的研究工作造成干擾;
c.DMF是變性劑(zui高濃度可達30%),滴加至多肽溶解;
d.反相層析法時,DMF將與洗脫液前鋒一起流出,根據入量的多少,峰值可能很高。大多數肽能在大量DMF流出后幾分鐘內流出,若肽鏈很小,洗脫太早,多肽的量將很低。
二、凍干多肽的保存
標有“凍干保存”說明的多肽應該保存在冰凍條件下,以-20℃以下zuijia,其活性可保持多年。當使用干凍產品時,開蓋前其容器應在裝有新鮮干燥箱內升至室溫。-20℃的產品,此過程需要一小時或更長,隨保裝而定。否則,當容器打開,水氣進入導致凝縮而降低穩定性。一旦打開,應迅速稱量完畢,立即封閉以免潮解,親水肽更應注意。
三、溶解多肽的保存
多肽溶液比干粉的穩定性差很多,為了獲得較好的效果,遵循以下原則:
1、分成小包裝避免反復凍融。使用多少解凍多少;
2、溶于pH5-7無菌的緩沖液中,-20℃儲存;
3、由于細菌能降解多肽,儲存前應過濾細菌;
4、包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化,因此應保存在無氧化劑的環境中。
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