細胞名稱:SNU-1 人胃癌細胞
組織來源:胃癌,腹水
培養條件:RPMI-1640+10% FBS
形 態:多細胞聚集、懸浮生長;上皮細胞樣
背 景:1984年J. Park與同事從在細胞毒性治療前取出的低分化原位胃癌中建立了SNU-1。L-多巴脫羧酶(DDC)陰性。VIP受體陽性,但胃受體缺失。沒有注意到存在 N-myc, L-myc, myb 和 EGF受體基因的擴增或重排的證據。細胞表達的c-myc和 c-erb-B-2 RNA水平與其它細胞株相當。以下基因不表達:N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 及胃泌素釋放肽。
SNU-1(人胃癌細胞)“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經過三個階段:游離期、指數增生期和停止期。常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數/100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%。接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數增生期(對數生長期),適宜進行各種試驗。
formazan結晶的生成量僅與活SNU-1(人胃癌細胞)數目成正比(死細胞中琥珀酸脫氫酶消失,不能將MTT還原)。還原生成的formazan結晶可在含50%的N,N-二甲基甲酰胺和20%的十二甲基磺酸鈉(pH 4.7)的MTT溶解液中溶解,利用酶標儀測定490 nm處的光密度OD值,以反映出活細胞數目。也可以用DMSO來溶解。MTT粉末和溶液保存時都需要避光,用鋁箔紙包好就可以。實驗的時候一般關閉超凈臺上的日光燈來避光,覺得這樣比較好。
1.接種:用含10%胎小牛血清得培養液配成單個細胞懸液,以每孔1000-10000個接種到96孔板,每孔體積200ul.
2.SNU-1(人胃癌細胞)培養:同一般培養條件,培養3-5天(可根據試驗目的和要求決定培養時間)。
3.呈色:培養3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS 配)20ul.
繼續孵育4小時,終止培養,小心吸棄孔內培養上清液,對于懸浮需要離心后再吸棄孔內培養上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10分鐘,使結晶物充分融解。
4.比色:選擇490nm波長,在酶聯免疫監測儀上測定各孔光吸收值,記錄結果,以時間為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制SNU-1(人胃癌細胞)生長曲線。
KP-N-NS人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移)
KU812人外周血嗜堿性白血病細胞
KURAMOCHI人卵巢癌細胞
kyse-140人食管癌細胞
Kyse450人食管癌細胞
KYSE-510人食管癌細胞
L78人肺腺鱗癌細胞
LAX人肺腺癌
LECPα-1人肺癌細胞
Li-7人肝癌細胞
lncap人前列腺癌細胞
LNCaP clone FGC人前列腺癌細胞
LoVo人結腸癌細胞