貨號：WT-E5600【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】ELISA試劑盒定量測定

ELSIA操作步驟復雜， 影響反應因素較多， 特別是固相載體的包被難達到各個體之間的*， 因此在定量測定中， 每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。 測定大分子量物質的夾心法 ELISA， 標準曲線的范圍一般較寬， 曲線zui高點的吸光度可接近2. 0， 繪制時常用半對數紙以檢測物的濃度為橫坐標，以吸光度為縱坐標，將各濃度的值逐點連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦， *較呈直線的部分是的檢測區域。【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】 甲胎蛋白質 ELI SA測定的標準曲線示例見圖4-1。測定小分子量物質常用競爭法（參見2.2），其標準曲線中吸光度與受檢物質的濃度呈負相關。標準曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。 ELISA測定的標準曲線示例見圖4-2。注意圖中橫坐標為對數關系， 這更有利于測定系統的表達。【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】

假陽性多，本底高甚至花板原因：1：過期試劑不能使用2：加樣時注意更換吸頭。盡可能避免污染。3：避免加酶時污染，應對先加樣后加酶的操作，加酶時要注意吸頭不要接觸標本，造成污染。當可能造成污染時，一定要更換吸頭，切忌僥幸心理。4：注意控制恒溫箱溫度，盡可能讓其穩定在37±0.5℃。5：如果整個操作時間過長、造成反應時間不同（*孔與zui后一孔反應時間相差很懸殊）。氣溫高時更明顯。建議在盡可能短的時間內完成操作。盡量不要堆積多塊板子操作（尤其手工操作時）。6：按照要求倍數稀釋洗液，避免洗液稀釋倍數過高。7：洗板次數按試劑要求，不可任意減少洗板次數，8：洗板時浸泡時間不夠，應按要求操作，并適當延長浸泡時間。9：手工洗板方式需要正確，洗板時，垂直加入洗液，保證一定的沖擊力；洗液要注滿板孔，并保證30-60秒的浸泡時間。10：防止組分的污染。如使用容器，注意容器的清潔。【人組蛋白去乙酰化酶(HDAC)ELISA試劑盒酶免法實驗】

重復性不好：重復同一樣品時，加樣量與加樣時間相同；同時注意移液器的校準。加樣后應該將酶標板放置在微量振蕩器上，充分混合；標本保證*、無污染；盡可能由同一名操作人員操作。盡可能模擬相同的反應條件。

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