雞白細(xì)胞介素-10(IL-10)ELISA試劑盒?品牌:子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
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雞白細(xì)胞介素-10(IL-10)ELISA試劑盒標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為300 pg/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
相關(guān)產(chǎn)品如下:Goat anti-human IgA/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記羊抗人IgA 0.1ml 子科ZIKER
Goat anti-human IgM/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記羊抗人IgM 0.1ml 子科ZIKER
SULT1E1(Estrogen Sulfotranferase) 雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml 子科ZIKER
Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子抗體 0.1ml 子科ZIKER
Survivin 細(xì)胞凋亡抑制因子抗體 0.2ml 子科ZIKER
SUMO(small ubiquitin-related modifier) 類泛素蛋白抗體 0.2ml 子科ZIKER
SV2A(Synaptic vesicle protein 2A) 突觸泡蛋白2A抗體 0.2ml 子科ZIKER
SYPH1(Synphilin-1) synphilin-1抗體 0.2ml 子科ZIKER
phospho-Syndecan 4(pSer179) 磷酸化多配體聚糖4抗體 0.2ml 子科ZIKER
SYK(Spleen tyrosine kinase) 非受體型酪氨酸蛋白激酶抗體 0.2ml 子科ZIKER
Goat anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記羊抗大鼠IgG 0.1ml 子科ZIKER
Goat anti-Guinea IgG/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記羊抗豚鼠IgG 0.1ml 子科ZIKER
SYVN1(synovial apoptosis inhibitor 1) hu、rat、mo、cattle 滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體 0.2ml 子科ZIKER
α-Synuclein(CT) 核突觸蛋白-α抗體(C端) 0.1ml 子科ZIKER
α-Synuclein(CT) 核突觸蛋白-α抗體(C端) 0.2ml 子科ZIKER
α-Synuclein 核突觸蛋白-α抗體 0.1ml 子科ZIKER
α-Synuclein(CT) 核突觸蛋白-α抗體(C端) 0.2ml 子科ZIKER
α-Synuclein 核突觸蛋白-α抗體 0.1ml 子科ZIKER
α-Synuclein 核突觸蛋白-α抗體 0.2ml 子科ZIKER
α-Synuclein 核突觸蛋白/突觸素-1抗體 0.1ml 子科ZIKER
α-Synuclein 核突觸蛋白/突觸素-1抗體 0.2ml 子科ZIKER
gamma Synuclein/SNCG 核突觸蛋白-γ抗體 0.2ml 子科ZIKER
rec Protein G/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記的重組蛋白G 0.1ml 子科ZIKER
Mouse anti-human IgG Monoclonal Antibody/AP 堿性磷酸酶標(biāo)記小鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml 子科ZIKER
Goat anti-human IgA/Biotin 生物素化羊抗人IgA 0.3ml 子科ZIKER
Goat anti-human IgG/Biotin 生物素化羊抗人IgG 0.1ml 子科ZIKER
Syntaxin 1/Syn1A(Synaptotagmin-Associated 35kD Protein) 突觸融合蛋白1抗體 0.2ml 子科ZIKER
SYT3(Synaptotagmin 3) 突觸結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml 子科ZIKER
T3(Triiodothyroxine) 三碘甲狀腺素T3抗體 0.2ml 子科ZIKER
TACR3/NK-3 receptor(tachykinin receptor 3) 速激肽受體3抗體 0.2ml 子科ZIKER
Tanis/SELS(Selenoprotein S) 炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體 0.2ml 子科ZIKER