人抗繆勒管激素(AMH)ELISA檢測試劑盒操作步驟:
1)取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。
2)分組:取出96孔板,根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設標準品組(6個濃度)、空白孔、待測樣品組。
3)標準品的稀釋:準備小試管6 只,依次編好號碼,先在各小試管中加入標準品稀釋液100ul,然后取原濃度標準品100ul加入一只已編好號的試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第二支試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第三只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul 加入第四只試管中,充分混勻;再在該試管中取100ul加入第五只試管中,充分混勻;然后在該試管中取100ul,棄掉。第六只試管作為0 號標準品。
注:為減少實驗誤差,保證準確性,建議設置復孔。
4)加樣:依照標準品的順序分別加入50ul的標準品溶液于空白微孔中;空白對照孔加入50ul的蒸餾水;其余微孔中先加樣品40ul然后再加*標記的抗體10ul。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
5)溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
6)洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒棄去,如此重復5 次,拍干。
7)加酶標溶液:標準品組、待測樣本組各孔中加入50ul的酶標溶液(空白對照孔除外)。
8)溫育:酶標板用封板紙密封后,放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。
9)洗板:用稀釋后的洗滌液注滿每孔,靜置15-30s,充分清洗酶標板5次,用吸水紙*拍干。
10)顯色:各孔加入顯色劑A液50ul后,再加入顯色劑B液50ul。
11)終止:25-37℃下避光反應10-15分鐘,加入50ul終止液。
12)讀板:在450nm波長讀取各孔的OD值。
注:讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡,讀板時間控制在終止反應后的30分鐘內(nèi),以免影響準確性。
五.數(shù)據(jù)計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實際濃度。
人抗繆勒管激素(AMH)ELISA檢測試劑盒注意事項:
1)實驗操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。
2)加樣:加樣時,要控制加樣速度,避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大,否則將會導致不同的預孵育時間,從而影響實驗的準確性以及重復性。
3)孵育:嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
反應時間的控制:加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化,如果顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
4)建議實驗前預測樣品含量,如樣品濃度過高,應對樣品進行稀釋,計算結(jié)果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
5)建議使用本試劑盒時先做預實驗(即先做標準曲線,試用幾個標本),如果對本試劑盒有任何疑問,可和所購經(jīng)銷商,如果因運輸過程導致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
人抗繆勒管激素(AMH)ELISA檢測試劑盒相關產(chǎn)品發(fā)布:
CCDA基礎 | 250g | 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法) |
Campy-Cefex瓊脂基礎 | 250g | 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法) |
改良CCD瓊脂基礎(mCCD) | 250g | 用于彎曲桿菌的分離培養(yǎng)(GB2008標準) |
Bolton肉湯 | 250g | 用于空腸彎曲菌的增菌(GB2008標準) |
Mueller-Hinton瓊脂(MHA) | 250g | 用于彎曲桿菌的藥物敏感性試驗 |
哥倫比亞血瓊脂基礎 | 250g | 用于彎曲桿菌的純化培養(yǎng) |
Preston肉湯基礎 | 250g | 用于空腸彎曲桿菌的選擇性增菌 |