產(chǎn)品名稱:Anti-Ephrin A1 Receptor抗體,肝配蛋白A1受體抗體
產(chǎn)品編號:BYK-15514R
英文名稱:Anti-Ephrin A1 Receptor
中文名稱:肝配蛋白A1受體抗體
英文別名:EPHA1_HUMAN; Ephrin type-A receptor 1; hEpha1; EPH tyrosine kinase; EPH tyrosine kinase 1; Erythropoietin-producing hepatoma receptor; Tyrosine-protein kinase receptor EPH.
英文介紹:This gene belongs to the ephrin receptor subfamily of the protein-tyrosine kinase family. EPH and EPH-related receptors have been implicated in mediating developmental events, particularly in the nervous system. Receptors in the EPH subfamily typically have a single kinase domain and an extracellular region containing a Cys-rich domain and 2 fibronectin type III repeats. The ephrin receptors are divided into 2 groups based on the similarity of their extracellular domain sequences and their affinities for binding ephrin-A and ephrin-B ligands. This gene is expressed in some human cancer cell lines and has been implicated in carcinogenesis.
產(chǎn)品規(guī)格:0.1ml/0.2ml
注意事項(xiàng):This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
此抗體本公司有單抗和多抗,可用于免疫組化(IHC),免疫印跡(WB),酶聯(lián)免疫(ELISA),IF、IP、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn)(可來電索取說明)
此產(chǎn)品本公司有標(biāo)記的一抗出售,相關(guān)標(biāo)記有:Alexa Fluor 350 標(biāo)記、Alexa Fluor 488 標(biāo)記、Alexa Fluor 555 標(biāo)記、Alexa Fluor 647 標(biāo)記、AP標(biāo)記、APC標(biāo)記、Biotin標(biāo)記、Cy3標(biāo)記、Cy5標(biāo)記、Cy5.5標(biāo)記、Cy7標(biāo)記、FITC標(biāo)記、Gold標(biāo)記、HRP標(biāo)記、PE標(biāo)記、PE-Cy3標(biāo)記、PE-CY5標(biāo)記、PE-CY5.5標(biāo)記、PE-CY7標(biāo)記、RBITC標(biāo)記
保存條件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.
Anti-Ephrin A1 Receptor抗體,肝配蛋白A1受體抗體優(yōu)勢產(chǎn)品:
byk-1595R 有絲抑制缺陷蛋白1抗體 Anti-MAD1
byk-2659R 巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體 Anti-MARCO
byk-2508R 整合素αX抗體 Anti-Integrin Alpha X/CD11c
byk-12508R ADP核糖基化因子1抗體 Anti-ARF1
byk-11014R 乙酰乳酸合成酶蛋白抗體 Anti-ILVBL
byk-1014R 整合素αM/巨噬細(xì)胞表面分子抗體 Anti-CD11b/Integrin αM/Integrin Alpha M
byk-1804R 整合素αL抗體Integrin αL Anti-Integrin alpha L/CD11a
byk-11804R 二磷酸腺苷核糖基化因子*核苷酸交換因子2抗體 Anti-ARFGEF2/BIG2
byk-12217R 鋅指蛋白263抗體 Anti-ZNF263
byk-2217R 整合素alpha E2抗體 Anti-Integrin alpha E2
byk-0101M 丙酮酸激酶-M2抗體 Anti-M2-PK
byk-11311R 血小板生成素受體抗體 Anti-TPOR/CD110/C-MPL
byk-1311R 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 Anti-LYVE-1
byk-0816R *抗體 Anti-Lysozyme
byk-2662R MD-2蛋白抗體 Anti-LY-96/MD-2
byk-2661R MD-1蛋白抗體 Anti-LY-86/MD-1
byk-2576R 淋巴細(xì)胞抗原6G抗體 Anti-Ly-6G/Gr-1
byk-12576R 磷酸化凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 Anti-phospho-DAP Kinase 1 (Ser 308)
byk-11971R 受體活性修飾蛋白2抗體 Anti-RAMP2
byk-1971R 羧肽酶抑制劑抗體 Anti-Lxn/Latexin
byk-0484R *抗體 Anti-Iumbrokinase
byk-10484R 乙酰肝素酶抗體 Anti-Heparanase
byk-2655R 白三烯B4受體2抗體 Anti-LTB4-R2
byk-2654R 白三烯B4受體1抗體 Anti-LTB4-R1/BLTR
byk-0683R 富*重復(fù)激酶2抗體 Anti-LRRK2
byk-11974R 膜相關(guān)蛋白樣蛋白NUMBL抗體 Anti-NUMBL
byk-1974R 腦瘤相關(guān)基因抗體 Anti-LRRC4
byk-2677R 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 Anti-LRP1/CD91
byk-0661R 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體 Anti-LRP/MVP
byk-1846R LRIG3抗體 Anti-LRIG3
Anti-Ephrin A1 Receptor抗體,肝配蛋白A1受體抗體免疫組化染色:
Western Blotting 具體實(shí)驗(yàn)步驟
Western,也稱Western blot、Western blotting、Western 印跡,是用抗體檢測蛋白的重要方法之一。
Western可以參考如下步驟進(jìn)行操作:
1、收集蛋白樣品(Protein sample preparation)
可以使用適當(dāng)?shù)牧呀庖毫呀赓N壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞或組織樣品。對于某些特定的亞細(xì)胞組份蛋白,例如細(xì)胞核蛋白、細(xì)胞漿蛋白、線粒體蛋白等,可以參考相關(guān)文獻(xiàn)提取這些亞細(xì)胞組份蛋白,也可以使用試劑盒進(jìn)行抽提。
收集完蛋白樣品后,為確保每個蛋白樣品的上樣量*,需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據(jù)所使用的裂解液的不同,需要采用適當(dāng)?shù)牡鞍诐舛葴y定方法。因?yàn)椴煌牡鞍诐舛葴y定方法對于一些去垢劑和還原劑等的兼容性差別很大。
2、電泳(Electrophoresis)
(1)、SDS-PAGE凝膠配制
SDS-PAGE凝膠可以參考一些文獻(xiàn)資料進(jìn)行配制,也可以使用博研生物生產(chǎn)的SDS-PAGE凝膠配制試劑盒。該試劑盒提供了除水和配膠器具外的所有試劑以及配制各種濃度SDS-PAGE的配方。
(2)、樣品處理
在收集的蛋白樣品中加入適量濃縮的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。例如2X或5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液。使用5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以減小上樣體積,在相同體積的上樣孔內(nèi)可以上樣更多的蛋白樣品。5X的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液可以參考相關(guān)文獻(xiàn)資料配制,也可以使用我公司生產(chǎn)的SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X) 。100℃或沸水浴加熱3-5分鐘,以充分變性蛋白。
(3)、上樣與電泳
冷卻到室溫后,把蛋白樣品直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。為了便于觀察電泳效果和轉(zhuǎn)膜效果,以及判斷蛋白分子量大小,使用預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)。
電泳時通常*在上層膠時使用低電壓恒壓電泳,而在溴酚藍(lán)進(jìn)入下層膠時使用高電壓恒壓電泳。對于Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)電泳裝置或類似電泳裝置,低電壓可以設(shè)置在80-100V,高電壓可以設(shè)置在120V左右。SDS-PAGE可以采用普通的電泳儀就可以滿足要求。為了電泳方便起見,也可以采用整個SDS-PAGE過程恒壓的方式,通常把電壓設(shè)置在100V,然后設(shè)定定時時間為90-120分鐘。設(shè)置定時可以避免經(jīng)常發(fā)生的電泳過頭。
通常電泳時溴酚藍(lán)到達(dá)膠的底端處附近即可停止電泳,或者可以根據(jù)預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)的電泳情況,預(yù)計(jì)目的蛋白已經(jīng)被適當(dāng)分離后即可停止電泳。
3、轉(zhuǎn)膜(Transfer)
我們*在Western實(shí)驗(yàn)中選用PVDF膜。硝酸纖維素膜(NC膜)或PVDF膜(二氟化樹脂膜膜孔徑:0.45um)也可以使用,但硝酸纖維素膜比較脆,在操作過程中特別是用鑷子夾取等過程中容易裂開。膜的使用請參考生產(chǎn)商的*使用步驟。
通常如果使用Bio-Rad的標(biāo)準(zhǔn)濕式轉(zhuǎn)膜裝置,可以設(shè)定轉(zhuǎn)膜電壓120V,轉(zhuǎn)膜時間為30-60分鐘。具體的轉(zhuǎn)膜時間要根據(jù)目的蛋白的大小而定,目的蛋白的分子量越大,需要的轉(zhuǎn)膜時間越長,目的蛋白的分子量越小,需要的轉(zhuǎn)膜時間越短。
在轉(zhuǎn)膜過程中,特別是高電流快速轉(zhuǎn)膜時,通常會有非常嚴(yán)重的發(fā)熱現(xiàn)象,把轉(zhuǎn)膜槽放置在冰浴中進(jìn)行轉(zhuǎn)膜。轉(zhuǎn)膜的效果可以觀察所使用的預(yù)染蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn),通常分子量zui大的1-2條帶較難全部轉(zhuǎn)到膜上。轉(zhuǎn)膜的效果也可以用麗春紅染色液對膜進(jìn)行染色,以觀察實(shí)際的轉(zhuǎn)膜效果。也可以用考馬斯亮藍(lán)快速染色液對完成轉(zhuǎn)膜的SDS-PAGE膠進(jìn)行染色,以觀察蛋白的殘留情況。
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