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人蛋白激酶C(PKC)ELISA Kit

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  • 公司名稱上海逸峰生物科技有限公司
  • 品       牌
  • 型       號YF3236
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質經銷商
  • 更新時間2017/7/20 22:27:41
  • 訪問次數1046
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人蛋白激酶C(PKC)ELISA Kit
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人蛋白激酶C(PKC)ELISA Kit 產品信息

人蛋白激酶C(PKC)ELISA Kit

規格:原裝/96T ELISA試劑盒分裝 48T/96T ELISA試劑盒

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實驗原理:以人干細胞生長因子SCGF-αElisa試劑盒為例

 

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人干細胞生長因子SCGF-α水平。用純化的人干細胞生長因子SCGF-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入干細胞生長因子SCGF-α),再與HRP標記的SCGF-α抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的干細胞生長因子SCGF-α)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人干細胞生長因子SCGF-α)含量

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。

2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000/分)去除顆粒。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBSPH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20保存,但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

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關鍵詞:酶標儀
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