ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，OGP Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測定中，每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對數(shù)紙，以檢測物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，OGP Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。
OGP Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：
- 標(biāo)本的采取和保存。
- 試劑的準(zhǔn)備
- 加樣。
- 保溫。
- 洗滌。
- 顯色和比色。
- 酶標(biāo)比色儀。
- 結(jié)果判斷。
將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過程。OGP Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，OGP Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合。可將聚苯乙烯板先經(jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，OGP Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。
脂類物質(zhì)無法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面。抗心磷脂抗體的ELISA試劑一般采用這種包被方式。
OGP Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyF551Mu 小鼠賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyC775Mu 小鼠絡(luò)絲蛋白(RL)檢測試劑盒 ELISA Kit for Reelin (RL) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyB547Mu 小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)檢測試劑盒 ELISA Kit for Indoleamine-2,3-Dioxygenase (IDO) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyE912Mu 小鼠沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyC033Mu 小鼠熱休克蛋白β8(HSPβ8)檢測試劑盒 ELISA Kit for Heat Shock Protein Beta 8 (HSPb8) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyB647Mu 小鼠趨化因子C-C-基元受體7(CCR7)檢測試劑盒 ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyB289Mu 小鼠整合素α3(ITGα3)檢測試劑盒 ELISA Kit for Integrin Alpha 3 (ITGa3) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyC210Mu 小鼠組蛋白脫乙酰基酶2(HDAC2)檢測試劑盒 ELISA Kit for Histone Deacetylase 2 (HDAC2) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyD021Mu 小鼠重肽鐵蛋白(FTH)檢測試劑盒 ELISA Kit for Ferritin, Heavy Polypeptide (FTH) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyB327Mu 小鼠生長關(guān)聯(lián)蛋白43(GAP43)檢測試劑盒 ELISA Kit for Growth Associated Protein 43 (GAP43) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyD152Mu 小鼠衰老關(guān)鍵蛋白2(FBLN2)檢測試劑盒 ELISA Kit for Fibulin 2 (FBLN2) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyF752Mu 小鼠外周蛋白(PRPH)檢測試劑盒 ELISA Kit for Peripherin (PRPH) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyD354Mu 小鼠Slit同源物1(Slit1)檢測試劑盒 ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyA726Mu 小鼠轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(TTR)檢測試劑盒 ELISA Kit for Transthyretin (TTR) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyC890Mu 小鼠5羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SERT)檢測試劑盒 ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyB673Mu 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)檢測試劑盒 ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7 (IGFBP7) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyE288Mu 小鼠含IQ基元GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)檢測試劑盒 ELISA Kit for IQ Motif Containing GTPase Activating Protein 2 (IQGAP2) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyF550Mu 小鼠核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測試劑盒 ELISA Kit for Lamin A/C (LMNA) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyE118Mu 小鼠肝配蛋白B受體3(EPHB3)檢測試劑盒 ELISA Kit for Ephrin Type B Receptor 3 (EPHB3) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyF834Mu 小鼠轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員4(TRPM4)檢測試劑盒 ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 4 (TRPM4) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
xyH756Mu 小鼠Klothoβ蛋白(KLβ)檢測試劑盒 ELISA Kit for Klotho Beta (KLb) 檢測范圍： 11.254-1000pg/ml
