商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 人細(xì)胞系 |
商品介紹
細(xì)胞別稱；NCI-H239；人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
種屬來源；人
組織來源；肺癌；非小細(xì)胞肺癌
生長特性；貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)
參考資料(來源文獻(xiàn))
NCI-H239細(xì)胞源于一位51歲患有非小細(xì)胞肺癌黑人男性患者的治療前的腫瘤組織，表達(dá)C-myc、L-myc、v-src、v-abl、v-erb B、c-raf 1、Ha-ras、Ki-ras、N-ras RNAs；該細(xì)胞攜帶K-ras 12突變；p53基因246位密碼子突變ATC→ATG；表達(dá)PDGF A和B鏈的異源mRNA；表達(dá)TGFα、TGFβ和EGFR；角蛋白 5、8和18陽性，波形蛋白陽性，神經(jīng)絲蛋白陰性，脫氫酶陰性；據(jù)報(bào)道，在軟瓊脂中該細(xì)胞形成克隆的效率 |
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白(MEPE)檢測試劑盒 ，英文名： MEPE ELISA Kit
Mouse nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)檢測試劑盒
MouseN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISAKit 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHSVIAb(HumanHerpessimplexvirusIaibody)ELISAKit人單皰疹病毒Ⅰ型抗體
細(xì)胞JAK3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-2R大鼠白介素2受體
LMAN2L重組人 LMAN2L 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
SYK (Spleen tyrosine kinase 0.5mgSYK (Spleen tyrosine kinase) 非受體型酪激酶(抗原)
IL1RAP重組人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 Protein
DPP4 Protein Human 重組人 DPP4 / CD26 蛋白
TNF Protein Human 重組人 TNF-alpha / TNFA 蛋白
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LMAN2L重組人 LMAN2L 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
TNF Protein Human 重組人 TNF-alpha / TNFA 蛋白
IL1RAP重組人 IL-1RAcP / IL-1R3 蛋白 Protein
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H239小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat tarate resista acid phosphatase 5b (ACP-5b) ELISA Kit 大鼠抗酸性0酸酶5b(ACP-5b)檢測試劑盒
HumanStaphylococalproteinA,SPAELISAKit 人葡萄球菌蛋白A(SPA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠ檢測試劑盒人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物鈣鎂ATP酶(Ca++/Mg++-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanγ-glamylsysteinesyhetase,γ-ECSELISAKit人γ谷氨酰半胱合成酶(γ-ECS)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠腦肽(mouse BNP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠N端前腦素(mouse -proBNP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP) 作用： ELISA 規(guī)格： 進(jìn)口分裝
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
