人胃癌細胞+luc;NCI-N87-LUC-EGFP-PURO
本公司所有產品僅供科學實驗，不做其他科學實驗外的使用！
種屬 | 人 | 規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
生長特性 | 貼壁生長 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 | 編號 | GOY-01X1827 |
商品詳情：
細胞別稱；NCI-N87-EGFP-LUC；人胃癌細胞-綠色熒光蛋白-熒光素酶標記；NCI-N87-綠色熒光蛋白-熒光素酶標記
種屬來源；人
組織來源；胃
生長特性；貼壁生長
形態特征；上皮細胞樣
特別注意；NCI-N87-LUC-EGFP細胞培養過程中會長空泡，屬于正?，F象
puro藥篩濃度；NCI-N87細胞puro藥篩濃度為0.5ug/ml，培養過程中建議使用0.2ug/ml濃度puro維持
參考資料(來源文獻)
NCI-N87細胞表達表面糖蛋白癌胚抗原(CEA)和TAG 72, 并且沒有胺脫羧酶(DDC)活性。它們的血管活性的腸肽(VIP)受體活性極低并缺乏胃泌激素受體。 它們表達蕈毒堿受體。沒有證據表明存在N-myc, L-myc, myb和EGF受體基因的重組。這個細胞株表達的c-myc和c-erb-B 2 RNA水平與其它細胞株相當。以下基因不表達: N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 或胃泌激素釋放肽。據報道NCI-N87 細胞的植板率為4.3%。 |
細胞培養操作：
1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產品說明書為主。
將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養基的培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養基，培養過夜）。第三天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
a、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養瓶置于37℃培養箱中消化1 -3min（視細胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加2-3ml培養基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養基的新皿中或者瓶中，置于培養箱中培養。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數。
b、根據細胞數量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養注意事項 ：
一、 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象 發生請及時和我們聯系。
二、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需 細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由 客戶自行承擔。
三、用 75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養箱放置 2-4h。
四、貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養基重懸 細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
五、 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
六、 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通 交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞 的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細胞僅供科研使用。
八、備注：運輸用的培養基 (灌液培養基) 不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培 養條件新配制的培養基來培養細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
九、 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
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