人漿細胞白血病細胞 NCI-H929 齊一生物科技(上海)有限公司是一家專業生產和銷售各種生化試劑,細胞株、原代細胞、菌種、醫藥中間體,標準品和對照品的大型化學科技公司.齊一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio。。com
人漿細胞白血病細胞 NCI-H929細胞培養方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況,出現此狀態時,請不要打開細胞培養瓶,應立即將培養瓶置于細胞培養箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養瓶中培養基吸出,留下 5-10ML培養基繼續培養:超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
4,將培養瓶置于37℃培養箱中培養,蓋子微微擰松。吸出的培養基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養瓶里的培養基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘??梢苑湃?7℃培養箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數量決定分瓶數,一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養瓶和換新鮮的培養液,37度 5%CO2 培養
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養基參考
500ml基礎培養基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養箱中使用
NDSB-201
NDSB-201
NDSB-211
NDSB-211
ND221
ND221
n-Octyl-b-D-maltoside
n-Octyl-b-D-maltoside
Proteomics Protein Controls-for yeast基因組學標準蛋白
Proteomics Protein Controls -for animal proteins基因組學標準蛋白
EZ-Buffers M 1x BLOK BSA in PBS緩沖液
EZ-Buffers N 1x BLOK BSA in TBS緩沖液
EZ-Buffers O 5x BLOK Casein in PBS緩沖液
Proteomics Protein Controls -for E. coli Proteins基因組學標準蛋白
Proteomics Protein Controls -for plant cell proteins基因組學標準蛋白
Proteomics Protein Control Set基因組學標準蛋白
Mammalian Cell Total Protein Lysis Buffer動物細胞蛋白裂解液
Yeast Total Protein Lysis Buffer酵母細胞蛋白裂解液
Bacterial Lysis Buffer細菌細胞蛋白裂解液
Inclusion body Solublization Buffer包涵體溶解液
RIPA Lysis Buffer IRIPA裂解液I
RIPA Lysis Buffer IIRIPA裂解液II
RIPA Lysis Buffer IIIRIPA裂解液III
RIPA Lysis Buffer IVRIPA裂解液IV
動物細胞用蛋白酶抑制劑復合物I,100X
動物細胞用蛋白酶抑制劑復合物II,10X
Plant Total Protein Lysis Buffer植物蛋白裂解液
Red Cell Lysis Buffer紅細胞裂解液
Nondenature Lysis Buffer非變性裂解液
Denature Lysis Buffer變性裂解液
White cell lysis buffer白細胞裂解液
磷酸酶抑制劑復合物 I 100X
磷酸酶抑制劑復合物 II 10X
10%AEBSF溶液
EZ-Buffers A 10XRunning buffer solution緩沖液
EZ-Buffers F (5x)Ponceau S staining solution緩沖液
EZ-Buffers G (5x)India ink staining solution緩沖液
5x一抗/二抗清除液
大鼠白介素3(IL-3)ELISA 試劑盒
大鼠白介素5(IL-5)ELISA 試劑盒
大鼠苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒
大鼠瘦素(LEP)ELISA 試劑盒
大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒
大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA 試劑盒
大鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 試劑盒
大鼠單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA 試劑盒
大鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶(MMP-8)ELISA 試劑盒
大鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA 試劑盒
大鼠骨保護素(OPG)ELISA 試劑盒
大鼠B因子(BF)ELISA 試劑盒
大鼠抑瘤素M(OSM)ELISA 試劑盒
大鼠胎盤生長因子(PLGF)ELISA 試劑盒
大鼠正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 試劑盒
大鼠L苯解氨酶(PAL)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性CD30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA 試劑盒
大鼠干細胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒
大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒
大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒
大鼠含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA 試劑盒
大鼠基質金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA 試劑盒
小鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒
大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(TRAIL-R4)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(sTRAIL)ELISA 試劑盒
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA 試劑盒
大鼠尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒