科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒

英文名稱：Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA試劑盒

產品別名：科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒

檢測種屬：大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬
用途：定量檢測試劑盒，于測定血清、血漿、組織和相關液體樣本中的含量或者活性,

產品詢價：您可以通過、郵件、傳真或在線客戶方式詢價
產品特點：是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢。,

適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床

規(guī)格：96T/48T

存儲條件：2-8℃

有效期：6個月

所需樣本體積： 50-100ul
反應時間： 1-5h
檢測波長： 450 nm
檢測方法：酶聯(lián)免疫法/酶免法（ELISA）
用途： For research use only. Not for diagnostic use.（只能用于科研，不可用于臨床診斷）

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科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒

一、雙抗體夾心法

1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。（簡稱洗滌，下同）。

2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。

3. 加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色，則410nm）處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

二、間接法

1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃；

2.次日洗滌3次；

3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌；

4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml；

5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌；

6.zui后一遍用DDW洗滌。

其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。

科研小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒

血清：全血標本于室溫放置2小時或4℃后于1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。血漿：抗凝劑*使用EDTA，標本采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測。避免使用溶血，高血脂標本。其它生物標本：1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。標本收集后若不及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃/-80℃電冰箱內，避免反復凍融，6個月內進行檢測,4℃保存的應在1周內進行檢測。 如果樣本中檢測物濃度高于標準品zui高值，請根據(jù)實際情況，做適當倍數(shù)稀釋(建議先做預實驗，以確定稀釋倍數(shù))。
酶標儀(450nm波長濾光片)高精度移液器，EP管及一次性吸頭：0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL,200-1000μL37℃恒溫箱, 雙蒸水或去離子水。

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