細胞名稱:HCCLM3 人高轉移肝癌細胞
培養條件:DMEM +10% FBS
形 態:上皮細胞樣;胞質內有顆粒
背 景:人肝癌細胞株MHCC97-H接種裸鼠,進行3次肺轉移篩選,取肺轉移瘤建成皮下接種后高度自發性肺轉移的肝癌細胞系。廣泛用于人肝癌發病機理的基礎和臨床研究,也可用于抗腫瘤藥物篩選。
HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)分離方法如下:
①過夜冷消化 將取得的組織用Hanks液洗三次,剪成碎塊大小為4毫米左右,用Hanks液洗2~3次以除去血球和脂肪組織,再加入0.25%的*,搖勻后放4℃過夜,次日再用Hanks液洗滌,棄去上清,共洗2~3次,然后,加入少量營養液吹打分散,細胞計數,按適當的濃度分瓶培養。
②多次提取消化法 多次提取消化法有以下三種:
1、熱消化多次提取 將剪碎的細胞塊加入0.25%*37℃水浴中消化15~20分鐘,HCCLM3(人高轉移肝癌細胞)然后經洗滌后用營養液分散制成細胞懸液,按合適的濃度分瓶培養,然后將留下的未*消化的組織按上述方法操作,再消化提取細胞。
2、冷消化多次提取 方法同上,只是消化溫度為4℃。
3、先熱消化后冷消化 將組織塊先用*于37℃下消化20分鐘經洗滌后用營養液分散,制成懸液,剩余未消化的小組織塊經洗滌后用*于4℃下過夜,次日再提取細胞,分散成懸液,分瓶培養。
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