細胞名稱:NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠成纖維細胞
組織來源:皮下結締組織;疏松結締組織及脂肪
培養條件:MEM +10% FBS
形 態:貼壁;成纖維細胞樣
背 景:1948年3月建立了NCTC clone 929(小鼠結締組織),細胞系L的克隆。細胞系L是zui早建立的連續培養細胞系之一,而clone 929是zui早的克隆株。從一只100日齡的雄性C3H/An小鼠的皮下網眼狀空隙和脂肪組織中建立了親本細胞系L。第95代的細胞系L使用毛細管法分離單細胞建立了clone929。檢測發現鼠痘病毒陰性。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠成纖維細胞 分離方法如下:
①過夜冷消化 將取得的組織用Hanks液洗三次,剪成碎塊大小為4毫米左右,用Hanks液洗2~3次以除去血球和脂肪組織,再加入0.25%的*,搖勻后放4℃過夜,次日再用Hanks液洗滌,棄去上清,共洗2~3次,然后,加入少量營養液吹打分散,細胞計數,按適當的濃度分瓶培養。
②多次提取消化法 多次提取消化法有以下三種:
1、熱消化多次提取 將剪碎的細胞塊加入0.25%*37℃水浴中消化15~20分鐘,NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠成纖維細胞 然后經洗滌后用營養液分散制成細胞懸液,按合適的濃度分瓶培養,然后將留下的未*消化的組織按上述方法操作,再消化提取細胞。
2、冷消化多次提取 方法同上,只是消化溫度為4℃。
3、先熱消化后冷消化 將組織塊先用*于37℃下消化20分鐘經洗滌后用營養液分散,制成懸液,剩余未消化的小組織塊經洗滌后用*于4℃下過夜,次日再提取細胞,分散成懸液,分瓶培養。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L] 小鼠成纖維細胞 現貨供應,更多相關產品如下:
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