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牛C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒
采用雙抗體夾心法,雙抗體夾心原理,是基于要測試的抗原具有二價以上的特性,能識別包被抗體,同時能識別檢測抗體,具體過程如下:
(1)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體,洗滌除去未結合的抗體及雜質,并用無關蛋白封閉空余結合位點。
(2)加受檢標本使之與固相抗體接觸反應一段時間,讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合,形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
(3)加*標記抗體,使固相免疫復合物上的抗原與*標記抗體結合。*洗滌未結合的*標記抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
(4)加辣根過氧化物酶標記親和素,使*標記抗體與辣根過氧化物酶標記的親和素結合。*洗滌未結合的酶標記物。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
(5)加入底物顯色,即可計算標本濃度。
(6)注:一個抗體分子上可以標記上若干個*分子,一個*分子可以結合一個辣根過氧化物酶標記的親和素,從而帶來了大量的辣根過氧化物酶結合到抗體上,比傳統的直接辣根過氧化物酶標記抗體具有更高的敏感性和放大效應。
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